[发明专利]一种蛹虫草活性蛋白CMPr及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种蛹虫草活性蛋白CMPr在制备增强机体免疫力的食品上的应用，其特征在于，所述蛹虫草活性蛋白CMPr的氨基酸序列如下所示：

MSFQTRFIGSNVLTNELGPDVKEMTLEFKEGEPIMIPQDATGTVKGECYEILVTFLNGTLRRYNAMNDYTFKEHVASKATMREGHTRVSIIGDSGVGGNFELVTRSA。

2.一种蛹虫草活性蛋白CMPr的制备方法在制备增强机体免疫力的食品上的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S100、将蛹虫草子实体磨粉后，加水搅拌均匀，0~4℃静置10~15h后，离心收集上清液，得蛹虫草子实体水溶性提取物；

步骤S200、对所述蛹虫草水溶性提取物进行饱和度为80％的硫酸铵沉淀，收集沉淀，0~4℃静置10~15h后，离心收集沉淀；

步骤S300、将所述沉淀溶于水后，装入截留分子量为3~3.5kDa的透析袋中，进行流水透析，透析时间为20~24h，透析期间每3~4h更换一次透析液；

步骤S400、收集透析产物并真空冷冻干燥，得蛹虫草子实体总蛋白；

步骤S10、用PBS缓冲液溶解蛹虫草子实体总蛋白，使蛋白浓度为15~20 mg/mL；

步骤S20、取2~3mL蛹虫草子实体总蛋白溶液，过滤后上样到分子筛Sephadex G-50层析柱，用PBS缓冲液洗脱，获取第一洗脱图谱，其中，所述第一洗脱图谱中，纵坐标为280nm吸收峰，横坐标为洗脱时间，所述上样的流速为0.3~0.5mL/min；

步骤S30、根据所述第一洗脱图谱，收集含有蛹虫草活性蛋白CMPr的组分；

步骤S40、采用截留分子量为3~3.5kDa的超滤管，将所述含有蛹虫草活性蛋白CMPr的组分浓缩至蛋白浓度为15-20 mg/mL；

步骤S50、取2~3mL浓缩溶液上样到Superdex 75凝胶层析柱中，用PBS缓冲液洗脱，获取第二洗脱图谱，并根据所述第二洗脱图谱收集纯的蛹虫草活性蛋白CMPr，其中，所述第二洗脱图谱中，纵坐标为280nm吸收峰，横坐标为洗脱时间，所述上样的流速为0.5~0.8mL/min；

其中，PBS缓冲液的pH为7.2~7.5，浓度为8~10mM；PBS缓冲液中氯化钠的浓度为130~150mM；

所述蛹虫草活性蛋白CMPr的氨基酸序列如下所示：

MSFQTRFIGSNVLTNELGPDVKEMTLEFKEGEPIMIPQDATGTVKGECYEILVTFLNGTLRRYNAMNDYTFKEHVASKATMREGHTRVSIIGDSGVGGNFELVTRSA。