[发明专利]一种携带肿瘤-睾丸抗原10基因的重组腺相关病毒载体及其应用价值有效
| 申请号： | 201911061395.5 | 申请日： | 2019-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN110684800B | 公开（公告）日： | 2020-11-03 |
| 发明（设计）人： | 刘勇;刘传新;江孝青;常爱全;李婵;黄家良;王洪亮 | 申请（专利权）人： | 深圳益世康宁生物科技有限公司;刘勇 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C12N15/66;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人： | 张帅 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区粤海街*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 携带 肿瘤 睾丸 抗原 10 基因 重组 相关 病毒 载体 及其 应用 价值 | ||
1.一种携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体，其特征在于：重组腺相关病毒载体中无腺相关病毒的结构基因，仅为携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体；
所述携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体的构建方法为：
从CT10抗原阳性的肿瘤组织获取总mRNA，由总mRNA进行逆转录反应，获得总cDNA；在上游引物ATACGCGTTCCTGAAGAAGTCGTCATGC和下游引物AT TCTAGACTCTGAAGCTAACTACCTGC的引导下进行PCR扩增，获得带有Mlu I和XbaⅠ限制性内切酶识别序列的CT10 cDNA；再将该CT10cDNA插入成功构建的出发载体，即腺相关病毒载体，在剔除腺相关病毒的结构基因的位置上，插入CT10抗原基因，得到该重组腺相关病毒载体；所述出发载体是经将含AAV 2型全基因组DNA的pBR322质粒pBR-AAV2中的AAV-2的包括rep和cap基因在内的全部结构基因删除，保留末端重复片段和/或p5启动子，并插入寡核苷酸片断，获得的AAV-2载体的基本骨架；所述寡核苷酸片段的序列为CTGCGCTGG。
2.一种与携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体相关的产品，其特征在于：包括携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体以及具有感染性的携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体；所述携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体即权利要求1所述携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体；所述具有感染性的携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体是由转染所述携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体，并进行细胞培养制得的。
3.一种表达CT10抗原的细胞系，其特征在于：所述细胞系为人单核细胞-树突状细胞系，且被由权利要求1所述的携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体感染或转染得到的。
4.一种具有CT10抗原特异性的T淋巴细胞系，其特征在于：所述细胞系为人淋巴细胞，且被由权利要求1所述的携带CT10抗原基因的重组腺相关病毒载体感染或转染的树突状细胞与人淋巴细胞混合培养产生的。
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