[发明专利]一种通过基因组编辑提高小麦抗性淀粉含量的方法及其技术体系有效
申请号: | 201911058387.5 | 申请日: | 2019-11-01 |
公开(公告)号: | CN110819654B | 公开(公告)日: | 2021-08-20 |
发明(设计)人: | 夏兰琴;李晶莹;马有志;孙永伟;陈隽 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/46 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 何叶喧 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通过 基因组 编辑 提高 小麦 抗性 淀粉 含量 方法 及其 技术 体系 | ||
1.一种提高小麦种子中的抗性淀粉含量和/或直链淀粉含量和/或总戊聚糖含量的方法,包括如下步骤:通过对SBEIIa基因进行基因编辑降低小麦中SBEIIa蛋白的丰度;
所述基因编辑是借助CRISPR/Cas9系统实现的;
所述CRISPR/Cas9系统中,sgRNA的靶标序列如下:tcctgagccgcgcggcctct;或者,所述CRISPR/Cas9系统中,sgRNA的靶标序列如下:gggaaggtcctggtgcctga。
2.特异sgRNA或特异重组质粒;
所述特异sgRNA为sgRNA1或sgRNA2;
sgRNA1的靶标序列如下:tcctgagccgcgcggcctct;
sgRNA2的靶标序列如下:gggaaggtcctggtgcctga;
所述特异重组质粒为pCXUN-Cas9-gRNA1或pCXUN-Cas9-gRNA2;
pCXUN-Cas9-gRNA1含有Cas9蛋白的编码基因和所述sgRNA1的编码基因;
pCXUN-Cas9-gRNA2含有Cas9蛋白的编码基因和所述sgRNA2的编码基因。
3.一种制备基因编辑小麦的方法,包括如下步骤:将权利要求2所述特异sgRNA的编码基因和Cas9蛋白的编码基因导入受体小麦,得到转基因小麦;然后将转基因小麦自交,获得自交后代;然后从自交后代中筛选基因编辑小麦;所述基因编辑小麦种子中抗性淀粉含量和/或直链淀粉含量和/或总戊聚糖含量高于所述受体小麦。
4.权利要求2所述特异sgRNA或权利要求2所述特异重组质粒在小麦育种中的应用;所述小麦育种的目的为提高小麦种子中的抗性淀粉含量和/或直链淀粉含量和/或总戊聚糖含量。
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