[发明专利]一种提高精液低温保存品质的精液稀释液及其应用方法

说明书

本发明涉及畜牧领域，具体公开了一种提高精液低温保存品质的精液稀释液及其应用方法。本发明提供的精液稀释液能够显著提高绵羊精液低温保存时间和受胎率，精液在低温下的有效保存时间能达到120小时，保存72小时内的受胎率能达到90％以上。本发明提供的精液稀释液制备简单，成本低廉，应用效果显著，对动物不产生任何有害影响，可以在动物精液保存及相关的胚胎移植产业和胚胎工程中广泛应用，具有广阔的市场前景。

技术领域

本发明涉及畜牧领域，具体地说，涉及一种提高精液低温保存品质的精液稀释液及应用方法。

背景技术

精液低温保存技术能充分利用优良种畜的遗传资源，迅速扩大畜群的良种比例和提高动物生产性能。同时，此技术也是治疗哺乳动物不孕症的有效辅助手段。精液稀释液是精子的保护剂，对精液保存的效果有重要的影响。哺乳动物常用的精液稀释液类型有柠檬酸一糖一卵黄类稀释液、蔗糖类稀释液和奶类稀释液。它们一般都由维持渗透压和pH缓冲的物质、抑菌物质和保护剂等组成。

羊的精液保存主要采用低温和冷冻保存。低温保存的优点是精液在4℃条件下能长期保存，从而实现远距离运输。目前，绵羊精液在48小时内输精后的情期受胎率与鲜精无明显差异，而48小时以后输精后的情期受胎率明显降低。冷冻保存通常是将精液用特定溶液稀释后包装在0.25mL细管中，然后放入液氮中保存。绵羊冻精解冻后的直线前进运动率在45％左右，人工授精后受胎率明显低于鲜精和液态保存精液。主要原因是绵羊精子质膜中含有高浓度的多不饱和脂肪酸，精子质膜在冷休克和活性氧存在的情况下易发生氧化，冷冻会对精子质量造成不可逆损伤，解冻后精子成活率较低，导致人工授精后受胎率低，相比较低温保存方法有很大缺陷。在生产过程中，精液的液态保存具有较大的应用前景。

我国是世界第一养羊大国，但总体生产性能低下，养羊业的经济效益较差。其主要原因是良种普及率低，生产群杂交利用不足。同期发情和人工授精是解决以上问题根本而有效的技术手段，其中精液的有效保存是关键技术环节。

本发明提供了一种有效的绵羊精液低温保存方法，对绵羊优良品种培育和生产群批次化生产具有重要应用价值。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明目的是提供一种提高精液低温保存品质的精液稀释液及应用方法。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

本发明提供一种提高精液低温保存品质的精液稀释液，包括如下组分：

NaCl,0.065g；CaCl₂(H₂O)₂，0.006g；MgCl₂(H₂O)₆，0.008g；NaHCO₃，0.10g；葡萄糖，0.10～1.00g；果糖，0.100～0.99g；三羟甲基氨基甲烷Tris，1.00～1.60g；柠檬酸，0.90g；蒸馏水定容至100mL，pH调整到6.8后，进行高压灭菌；

室温冷却后加入抑菌物质得到配制A液；

量取一定量的配制A液，在配制A液中加入卵黄，所述卵黄的加入量为总体积的2.5～10％，得到基础稀释液；

在每升基础稀释液中添加0.5g～10.0g的过氧化氢酶和2g～30g牛血清蛋白，充分混匀后，得到所述精液稀释液，所述精液稀释液于4℃保存；

在上述方案的基础上，所述基础稀释液，含有如下成分：