[发明专利]检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法

权利要求书

1.一组可用于检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的引物对，其特征在于，所述引物对中，上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。

2.一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述方法为以已知MSTN基因g.+6723位点基因型的绵羊的基因组DNA作为内标，先使用权利要求1所述的引物对对MSTN基因g.+6723位点的基因型为AA的绵羊的基因组DNA、MSTN基因g.+6723位点的基因型为AG的绵羊的基因组DNA、MSTN基因g.+6723位点的基因型为GG的绵羊的基因组DNA以及待测绵羊的基因组DNA进行扩增，然后对扩增产物进行高分辨率熔解曲线分析，最后根据待测绵羊的基因组DNA扩增获得的高分辨率熔解曲线与MSTN基因g.+6723位点的基因型为AA的绵羊的基因组DNA、MSTN基因g.+6723位点的基因型为AG的绵羊的基因组DNA以及MSTN基因g.+6723位点的基因型为GG的绵羊的基因组DNA扩增获得的高分辨率熔解曲线判断待测绵羊MSTN基因g.+6723位点的基因型。

3.如权利要求2所述的一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述扩增以及高分辨率熔解曲线分析均在实时荧光定量PCR仪上进行。

4.如权利要求3所述的一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述高分辨率熔解曲线由实时荧光定量PCR仪配套软件的Gene Scanning模块自动生成；所述判断的程序为：先在实时荧光定量PCR仪配套软件的gene scanning模块中将MSTN基因g.+6723位点的基因型为AA的绵羊的基因组DNA、MSTN基因g.+6723位点的基因型为AG的绵羊的基因组DNA以及MSTN基因g.+6723位点的基因型为GG的绵羊的基因组DNA设为stand样，并且，标注基因型，然后对扩增产物进行高分辨率熔解曲线分析，最后genescanning模块会自动以stand样为判断基准，根据位移曲线判断待测绵羊的基因型。

5.如权利要求2-4任一所述的一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述扩增的反应体系为20 μL，含有5 ng待测绵羊的基因组DNA、10μL 2× MasterMix、4.0 mmol/L MgCl₂以及0.1 μM权利要求1所述的引物对。

6.如权利要求2所述的一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述扩增的程序为：先95℃预变性10 min，然后95℃变性15 s、57℃退火20 s、72℃延伸20 s的过程进行45个循环。

7.如权利要求2所述的一种检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的方法，其特征在于，所述高分辨率熔解曲线分析的程序为：扩增的程序结束后，先95℃变性1 min，然后40℃退火1 min，再从65℃连续升温至95℃，最后降温至40℃；连续升温的速率为1℃/s；连续升温期间，每秒采集荧光信号25次。

8.一种可用于检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的产品，其特征在于，所述产品含有权利要求1所述的引物对。

9.如权利要求8所述的一种可用于检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型的产品，其特征在于，所述产品为检测试剂或检测试剂盒。

10.权利要求1所述的引物对或权利要求2-7所述的方法或权利要求8或9所述的产品在检测绵羊MSTN基因g.+6723位点基因型中的应用。