[发明专利]一种提高纤维素酶稳定性的方法

说明书

本发明涉及一种提高纤维素酶稳定性的方法，是在纤维素酶液中加入脂肽，所述脂肽的序列为C_nKK‑NH₂，C_n代表疏水烷基链，14≤n≤18，K代表赖氨酸。本发明采用序列为C_nKK‑NH₂的脂肽作为纤维素酶稳定剂，能够提高纤维素酶的保存稳定性，实现酶的常温稳定保存。

技术领域

本发明属于生物酶制剂技术领域，具体涉及一种提高纤维素酶稳定性的方法。

背景技术

纤维素酶是生物产生的一种多组分的混合蛋白质，在适当的条件下，能使不溶性纤维素材料水解成可溶性糖的生物催化剂的总称。纤维素酶具有蛋白质的物理化学性能和四级结构特征，其精细而复杂的主题构象决定了酶的一些独特性能，如高催化效率、高度专一性以及其作用容易受外界条件的影响等。

然而，在酶制剂工业化应用过程中，酶不可避免需要在一定条件进行长时间的运输和储存。作为一种生物催化剂，特别是在常温条件下，液体酶的活性在长时间的运输和储存过程中极易受到环境因素变化以及微生物污染的影响。细小的环境因素如温度，压力，pH及离子强度的变化都可能引起酶蛋白的变性失活，同时对微生物来说，酶液也是一种十分丰富的营养液，在常温条件下极易导致微生物的生长，引起酶蛋白的生物降解失活。因此，如何尽可能地保持酶在运输、储存过程中的稳定性是酶制剂在相关领域中获得工业化应用的首要前提。

目前提高酶的稳定性，常用的方法有：（1）自然筛选或蛋白质工程手段获的高稳定性的酶蛋白；（2）化学修饰和固定化处理；（3）添加保护剂。其中添加保护剂具有方法简单、成本低和易于操作等多方面优点，是目前工业上提高酶稳定性的重要手段之一。

CN200910210391.9公开了一种酶结合物稳定液，其由蛋白质物质、糖类物质、氨基酸类物质、安替比林、维生素C、表面活性剂、硫酸庆大霉素、Proclin300和磷酸盐缓冲液组成。该稳定液组成成份较为复杂，且某些残留物会影响后续发酵体系。

因此，基于纤维素酶稳定性的问题，很有必要开发组成简单、价格低廉、绿色环保且不会影响后续使用功能的稳定剂和稳定方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种提高纤维素酶稳定性的方法。本发明采用序列为C_nKK-NH₂的脂肽作为纤维素酶稳定剂，能够提高纤维素酶的保存稳定性，实现酶的常温稳定保存。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

在纤维素酶液中加入脂肽，所述脂肽的序列为C_nKK-NH₂，C_n代表疏水烷基链，14≤n≤18，K代表赖氨酸。

本发明中，所述脂肽包含一个疏水烷基链和两个亲水的赖氨酸，序列碳端氨化，疏水烷基链来源于脂肪酸，如可以是单一脂肪酸或混合脂肪酸，优选大豆油酸、棉油酸等植物油脂肪酸。所述脂肽可以利用多肽微波合成仪自行合成或通过商业途径获得。

本发明中，所述的脂肽加入量为纤维素酶酶活×纤维素酶液的质量×(0.02%-0.40%)，优选为纤维素酶酶活×纤维素酶液的质量×(0.10%-0.30%)。

本发明中，在纤维素酶液中加入脂肽后，在常温密闭保存，保存温度为10-40℃。