[发明专利]基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法

说明书

本发明涉及食品检测技术领域，具体地涉及一种基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法，以银纳米溶胶颗粒作为活性增强基底，提取鸡蛋丙酮提取液，静电富集和拉曼光谱检测获得SERS光谱；通过对比不含四环素类的丙酮鸡蛋提取液、含有抗生素的丙酮提取液的不同浓度的工作标曲点，找出拉曼特最佳征峰位置，作为定量峰。本发明提供的基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留量的方法，简便、快捷、易于实时探测，且可以进行定量分析，对于食品中抗生素污染的严格控制具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，特别是涉及一种基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法。

背景技术

我国是家禽养殖大国，2005年禽蛋年总产量已达28795 万吨，位居世界首位，其中鸡蛋由于营养丰富、易被吸收、口感良好、价格便宜而深受消费者喜爱。鸡蛋占绝大部分禽蛋市场，而90％以上的鸡蛋都是由农户和小企业生产的，尽管目前无公害食品蛋鸡饲养允许使用的治疗药物受到严格限制，但实际生产中，为降低疫病风险，滥用误用抗生素现象十分严重，同时通过环境和食物链的作用致使药物残留问题也日益加剧。

四环素、土霉素、金霉素以及多西环素均为四环素类兽医专用药，在各类动物疾病的预防和治疗中具有良好的应用价值。农业部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》规定产蛋鸡不得添加。四环素类抗生素对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有较好的防治作用，该类药物与喹诺酮类药物均属于目前应用最为广泛的兽用抗生素。四环素类药物可在动物体内残留，并随食品进入人体，危害人体健康，尤其是对儿童的牙齿损害最大。

目前，测定该类抗生素药物残留的主要方法有微生物法、酶联检测免疫技术、高效液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱检测技术等。然而，微生物法和酶联检测免疫技术操作繁琐、灵敏度低、耗时(＞2h)；精确检测一般采用GB/T 5009.116-2003畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定( 高效液相色谱法) 方法，但需用到液相色谱仪等大型仪器，不适合快速检测，而且检测比较费时间；同时，对于复杂的多组分体系分离体系效率不够理想，而且由于大量使用有机溶剂，易对环境造成污染。而有的时候，食品安全、药品安全、饲料检测等要求进行现场的快速检测，并不需要精确的分析检测结果。因此，寻找一种简便、快捷、易于实时探测的抗生素检测新方法对于食品中抗生素污染的严格控制具有重要的意义。

发明内容

本发明为了克服上述技术问题的不足，提供了一种基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留量的方法，该方法操作简便，快捷，易于实时探测，且可以进行定量分析。

解决上述技术问题的技术方案如下：

基于SERS检测鸡蛋中四环素类抗生素残留的方法，所述的四环素类抗生素包括土霉素、四环素或金霉素，包括以下步骤：

（1）活性增强基底的制备

采用传统的微波加热方法制备银纳米溶胶颗粒，即在微波加热条件下，利用柠檬酸三钠还原硝酸银制备银溶胶，反应一段时间后，当银纳米溶胶的颜色由红色变为灰绿色时，停止加热并将银纳米溶胶取出，自然冷却至室温，乙醇5000r/min离心清洗至少3遍，于4℃保存备用；吸取10μL银纳米溶胶均匀附于丝网印刷电极的碳工作电极上，烘箱内60℃烘干，重复镀制三次，制成0.5 cm×0.5 cm银纳米镀膜作为 SERS 活性增强基底；

（2）鸡蛋提取液样品的制备

取鸡蛋破壳，置于均质机内充分作用均匀，取5g均匀蛋液置于50mL离心管内，再加入5g无水硫酸钠和10mL丙酮，涡旋3min，超声10min，5000r/min离心5min，取上清液得鸡蛋提取液样品；

（3）静电富集和拉曼光谱检测