[发明专利]一种TMAO及其相关代谢产物的检测方法在审
| 申请号： | 201911021655.6 | 申请日： | 2019-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN110687227A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 邓军亮;楼格尔;钟召赟;黄颖瑜;秦欢欢;王剑锋;王琪;杜杰;刘志鹏;周雪敏 | 申请（专利权）人： | 上海阿趣生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72 |
| 代理公司： | 31333 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 谭慧 |
| 地址： | 200438 上海市杨浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 代谢产物 检测 混合液 中间液 稀释 色谱 上机 质谱 标准溶液配制 目标分析物 目标化合物 标准溶液 化学检测 取上清液 样本溶液 液相色谱 质谱条件 代谢物 灵敏度 备用 配制 样本 诊断 线索 疾病 申请 预防 治疗 分析 | ||
1.一种TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)代谢物提取：将处理后的样本溶液离心，取上清液，备用；
2)标准溶液配制：分别配制各目标化合物的单标中间液，再将各单标中间液混合、稀释，配制成外标混合液，依次稀释该外标混合液，得一系列标准溶液；
3)上机检测：设置液相色谱和质谱条件，进行上机检测；
所述液相色谱的流动相A相选自甲酸铵、甲酸铵水溶液、甲酸、甲酸水溶液中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述处理后的样本溶液中包括内标混合液。
3.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的流动相A相为甲酸铵水溶液和甲酸水溶液。
4.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的流动相B相为乙腈。
5.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述液相色谱的梯度洗脱条件为：
0-1min：流动相A为10％→10％，流动相B为90％→90％；
1-6.5min：流动相A为10％→29.5％，流动相B为90％→70.5％；
6.5-8min：流动相A为29.5％→50％，流动相B为70.5％→50％；
8-9.3min：流动相A为50％→50％，流动相B为50％→50％；
9.3-9.5min：流动相A为50％→10％，流动相B为50％→90％；
9.5-13min：流动相A为10％→10％，流动相B为90％→90％。
6.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述质谱的仪器为三重四极杆质谱仪。
7.根据权利要求6所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述质谱的离子源参数如下：Capillary voltage＝+4000/-3500V，nozzle voltage＝+500/-500V。
8.根据权利要求6或7所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述质谱的离子源参数还包括：gas temperature＝300℃，gas flow＝5L/min，sheath gastemperature＝250℃，sheath gas flow＝11L/min，nebulizer＝45psi。
9.根据权利要求1所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法，其特征在于，所述质谱的分析采用MRM模式。
10.一种如权利要求1～9任一项所述的TMAO及其相关代谢产物的检测方法在检测TMAO及其相关代谢产物中的应用。
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