[发明专利]一种连翘药材指纹图谱的建立方法

说明书

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种连翘药材指纹图谱的建立方法。该方法具体通过以下步骤实现的：对照品溶液的制备：取连翘苷、连翘酯苷A、异连翘酯苷、芦丁、连翘酯素对照品适量，制成对照品溶液；供试品溶液的制备：称取连翘药材粉末，加热回流提取，取续滤液；经滤膜滤过，取续滤液为样品溶液；量取样品溶液和葛根素水溶液，混匀，得供试品溶液；采用高效液相色谱法检测，建立指纹图谱。本发明采用了不同的梯度洗脱对连翘药材进行高效液相色谱检测，分离效果好；通过外加内标，使得建立的指纹图谱具有半定量的功能，能够有效的表示样品间成分量的变化，从而更加精确的评判样品的质量；能够更加全面的对原料药连翘药材进行质量监控。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种连翘药材指纹图谱的建立方法。

背景技术

连翘为木犀科植物连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)的干燥果实，秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称“青翘”；果实熟透时采收，晒干，除去杂质，习称“老翘”^[1]。连翘具有清热解毒、消肿散结、疏散风热之功效，主治丹毒、温热、瘰疬、痈疡肿毒、斑疹、小便淋闭等症^[2]。现代药理研究表明，连翘具有抗菌、抗病毒、抗炎、解热、镇吐、利尿等作用^[3]。目前，连翘疗效确切，毒副作用较低，用途及临床应用广泛，为双黄连口服液、双黄连粉针剂、清热解毒口服液、连草解热口服液、银翘解毒冲剂等中药制剂的主要原料之一。

目前在连翘药材的质量控制项目中，2015年版《中国药典》中仅采取测定连翘苷和连翘酯苷A含量作为控制连翘药材的质量，检测成分较为单一，不能从整体上反映连翘药材的内在质量，已有研究对其进行了指纹图谱相关研究，各有特点。文献《连翘的HPLC指纹谱图研究》提供了一种指纹图谱的建立方法，该方法以药物自身含有的成分作为内标，该种方法会因为各批样品的差异性，从而导致参比值发生较大的变化，所得到的相对峰面积仅能表示单一样品中各成分间的比例变化，不能表示样品间成分的量的变化，故该方法仅能够进行定性比较，无法精确的判断药材的质量。因此，研究一种能够精确的判断药材质量的方法成为了亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种连翘药材指纹图谱的建立方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种连翘药材指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取连翘苷、连翘酯苷A、异连翘酯苷、芦丁、连翘酯素对照品适量，精密称定，加甲醇制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：按比例称取过80目和50目筛的连翘药材粉末，精密称定，置于圆底烧瓶中，加水，称重，加热回流提取30min，放冷，补重，过滤，取续滤液；经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液为样品溶液；量取样品溶液和葛根素水溶液，混匀，得供试品溶液；

(3)采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱。

进一步的，步骤(1)中，所述对照品溶液具体的浓度为：连翘苷溶液的浓度为0.2mg/mL；连翘酯苷A溶液的浓度为0.1mg/mL；异连翘酯苷溶液的浓度为0.1mg/mL；芦丁溶液的浓度为1.0mg/mL；取连翘酯素溶液的浓度为60μg/mL。

进一步的，步骤(2)中，所述连翘药材粉末和水的料液比为0.05g/mL。

进一步的，步骤(2)中，所述样品溶液和葛根素溶液的体积比为1：1。

上述葛根素水溶液的浓度为50μg·mL^-1。