[发明专利]一种连翘药材指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种连翘药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对照品溶液的制备：取连翘苷、连翘酯苷A、异连翘酯苷、芦丁、连翘酯素对照品适量，精密称定，加甲醇制成对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：按比例称取过80目和50目筛的连翘药材粉末，精密称定，置于圆底烧瓶中，加水，称重，加热回流提取30 min，放冷，补重，过滤，取续滤液；经0.45 µm微孔滤膜滤过，取续滤液为样品溶液；量取样品溶液和葛根素水溶液，混匀，得供试品溶液；

（3）采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱；

所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为Inert Sustain C₁₈，250 mm×4.6 mm，5µm，流动相为0.1 %甲酸溶液（A）-乙腈（B）进行梯度洗脱，检测波长235 nm，柱温30℃为色谱条件，进样10 μL，测定时间200 min；

所述梯度洗脱的条件如下：

。

2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤（1）中，所述对照品溶液具体的浓度为：连翘苷溶液的浓度为0.2 mg/mL、连翘酯苷A溶液的浓度为0.1 mg/mL、异连翘酯苷溶液的浓度为0.1 mg/mL、芦丁溶液的浓度为1.0 mg/mL和连翘酯素溶液的浓度为60 μg/mL。

3.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，所述连翘药材粉末和水的料液比为0.05g/mL。

4.根据权利要求1或3所述的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，所述样品溶液和葛根素溶液的体积比为1：1。

5.根据权利要求4所述的建立方法，其特征在于，所述葛根素水溶液的浓度为50 µg·mL^-1。