[发明专利]一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法有效

专利信息
申请号: 201911000354.5 申请日: 2019-10-21
公开(公告)号: CN110926890B 公开(公告)日: 2022-02-18
发明(设计)人: 卢洁;姚托;叶灵通;王江勇 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院南海水产研究所
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N24/08
代理公司: 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 代理人: 余敏
地址: 510000 *** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 提取 胰腺 代谢物 方法
【权利要求书】:

1.一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、往鲍肝胰腺中加入甲醇和水,低温震荡破碎,所述甲醇与水之间的体积百分比为50%~75%;

S2、往步骤S1中加入氯仿和水,混匀后于-4~0℃下静置不少于10 min;

S3、静置后进行离心处理,收集上层溶液;

S4、将步骤S3中得到的上层溶液真空冻干成冻干粉末;

S5、往冻干粉末中加入甲醇和水,经低温超声处理后于-4~0℃下静置不少于10 min,所述甲醇与水之间的体积百分比为80%~90%;

S6、静置后进行离心处理,收集上层溶液,并保留下层的沉淀;

S7、往步骤S6的沉淀中再加入甲醇和水,经低温超声处理后于-4~0℃下静置不少于10min,所述甲醇与水之间的体积百分比为80%~90%;

S8、静置后进行离心处理,收集上层溶液并与步骤S6中得到的上层溶液混合;

S9、将步骤S8中得到的上层溶液经真空冻干后得到粉末状的鲍肝胰腺代谢物;

S10、往步骤S9的鲍肝胰腺代谢物粉末中加入磷酸盐缓冲液,充分溶解后进行离心处理,收集上层溶液即可得到水溶性的鲍肝胰腺代谢物。

2.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,按mg/mL计,步骤S1所述的鲍肝胰腺与甲醇之间的质量体积比为300: 1.0~1.4。

3.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的氯仿与步骤S1所述的甲醇之间的体积比为1~3: 1。

4.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的氯仿与水之间的体积百分比为45%~55%。

5.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的混匀为以不低于2500 rpm的速度涡旋30-90 s。

6.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S5和S7所述甲醇的添加量均为步骤1所述甲醇的70~80%。

7.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S5和S7所述低温超声处理为于4 ℃下以不低于100 W的功率超声处理8-12 min。

8.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S3、S6、S8和S10所述的离心处理为4 °C、10000 g离心10 min。

9.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S4和步骤S9所述的上层溶液在真空冻干前先进行液氮速冻处理。

10.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S10所述磷酸盐缓冲液的添加量为步骤1所述甲醇的40~50%。

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