[发明专利]一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法有效
| 申请号: | 201911000354.5 | 申请日: | 2019-10-21 |
| 公开(公告)号: | CN110926890B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
| 发明(设计)人: | 卢洁;姚托;叶灵通;王江勇 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N24/08 |
| 代理公司: | 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 | 代理人: | 余敏 |
| 地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 提取 胰腺 代谢物 方法 | ||
1.一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、往鲍肝胰腺中加入甲醇和水,低温震荡破碎,所述甲醇与水之间的体积百分比为50%~75%;
S2、往步骤S1中加入氯仿和水,混匀后于-4~0℃下静置不少于10 min;
S3、静置后进行离心处理,收集上层溶液;
S4、将步骤S3中得到的上层溶液真空冻干成冻干粉末;
S5、往冻干粉末中加入甲醇和水,经低温超声处理后于-4~0℃下静置不少于10 min,所述甲醇与水之间的体积百分比为80%~90%;
S6、静置后进行离心处理,收集上层溶液,并保留下层的沉淀;
S7、往步骤S6的沉淀中再加入甲醇和水,经低温超声处理后于-4~0℃下静置不少于10min,所述甲醇与水之间的体积百分比为80%~90%;
S8、静置后进行离心处理,收集上层溶液并与步骤S6中得到的上层溶液混合;
S9、将步骤S8中得到的上层溶液经真空冻干后得到粉末状的鲍肝胰腺代谢物;
S10、往步骤S9的鲍肝胰腺代谢物粉末中加入磷酸盐缓冲液,充分溶解后进行离心处理,收集上层溶液即可得到水溶性的鲍肝胰腺代谢物。
2.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,按mg/mL计,步骤S1所述的鲍肝胰腺与甲醇之间的质量体积比为300: 1.0~1.4。
3.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的氯仿与步骤S1所述的甲醇之间的体积比为1~3: 1。
4.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的氯仿与水之间的体积百分比为45%~55%。
5.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S2所述的混匀为以不低于2500 rpm的速度涡旋30-90 s。
6.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S5和S7所述甲醇的添加量均为步骤1所述甲醇的70~80%。
7.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S5和S7所述低温超声处理为于4 ℃下以不低于100 W的功率超声处理8-12 min。
8.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S3、S6、S8和S10所述的离心处理为4 °C、10000 g离心10 min。
9.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S4和步骤S9所述的上层溶液在真空冻干前先进行液氮速冻处理。
10.根据权利要求1所述的一种提取鲍肝胰腺代谢物的方法,其特征在于,步骤S10所述磷酸盐缓冲液的添加量为步骤1所述甲醇的40~50%。
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