[发明专利]一种乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法及应用在审
| 申请号： | 201910983991.2 | 申请日： | 2019-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN110656120A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 孙强明;魏春燕;李琳昊;王恒;管娇琼;李代英 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医学生物学研究所;中国医学科学院基础医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/40;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 53210 昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 牛林涛 |
| 地址： | 650118 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 同源重组技术 线性化载体 插入片段 乙脑病毒 克隆 定向克隆 反向引物 合成序列 基因序列 末端序列 全长克隆 实验步骤 非连接 耐受度 同源臂 阳性率 重组酶 酶切 位点 催化 合成 基因 节约 引入 | ||
【权利要求书】：
1.一种乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法，其特征在于，根据NCBI公布的D90195.1基因序列为参照分别合成6段基因序列，利用同源重组技术通过相应酶切位点将合成序列依次克隆至线性化载体中，获得乙脑病毒SA14-14-2的全长克隆。
2.根据权利要求1所述的乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法，其特征在于，所述线性化载体为pcr2.1载体。
3.根据权利要求1所述的乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法，其特征在于，所述乙脑病毒SA14-14-2的全长cDNA序列如序列表1所示。
4.根据权利要求1所述的乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法，其特征在于，合成6段基因序列分别如序列表2-序列表7所示。
5.乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法在新型乙脑重组嵌合疫苗的制备中的用途。
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