[发明专利]罗汉果新苷及其制备方法

权利要求书

1.一类罗汉果新苷类化合物的制备方法，其特征在于，所述罗汉果新苷类化合物为罗汉果新苷A、罗汉果新苷B，其化学结构为:

所述的制备方法，以罗汉果甜苷为原料，通过将弯孢菌Curvularia lunata和总状毛霉Mucor racemosus组合发酵转化后，依次经萃取层析和HPLC制备分离，得到罗汉果新苷A和罗汉果新苷B精制品；

所述的组合发酵，弯孢菌Curvularia lunata和总状毛霉Mucorracemosus的质量比为1:3～3:1；

所述的发酵转化，弯孢菌Curvularia lunata和总状毛霉Mucorracemosus的质量与甜苷质量的比例为1:10～3:10，发酵温度为25～30℃，发酵时间为3～5天；

所述的萃取，采用乙酸乙酯，其用量与罗汉果甜苷质量比为1mL:8mg，萃取次数为2～3次；

所述的层析是指:将萃取物经硅胶柱层析，其硅胶粒径为200～300目，样品与硅胶的质量比为1:60～1:100，先用二氯甲烷洗脱除去杂质，继用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱后TLC法检测，合并主斑点R_f为0.3～0.6的流份，然后回收溶剂得罗汉果新苷粗品；

所述的梯度洗脱，采用二氯甲烷-甲醇体积比例为1:0、9:1、17:3、4:1，每个梯度洗脱4～6BV，流速1BV/h，0.25BV/流份；收集洗脱液后进行TLC检测，合并主斑点R_f0.3～0.6的流份，减压回收溶剂，得罗汉果新苷粗品；

所述的HPLC制备分离是指:采用乙腈-水体积比为1:9～1:0梯度洗脱，DAD检测，分别收集两个最大吸收波长为205nm的主峰，回收溶剂即得罗汉果新苷A、罗汉果新苷B精制品，采用的色谱柱为C₁₈柱，250*10mm，5μm，流动相为乙腈-水，梯度洗脱30min，流速为4.0mL/min。