[发明专利]一种蜂毒溶血肽隐蔽溶血毒副作用的方法

权利要求书

1.一种蜂毒溶血肽隐蔽溶血毒副作用的方法，其特征在于：以天然蜂毒干粉或者采用生物多肽固相合成法合成的蜂毒溶血肽粗肽为原料，经过凝胶过滤色谱柱分离、反相高效液相色谱纯化，制得质量含量大于98%蜂毒溶血肽，其中在凝胶过滤色谱柱分离过程中采用隐蔽剂溶解；然后将蜂毒溶血肽经过超滤膜、纳滤膜、半透膜中的一种或几种分子筛处理后，即得到无溶血活性的蜂毒肽；

所述的隐蔽剂为1mmol/L～1000mmol/L的有机酸溶液或1mmol/L～1000mmol/L有机酸-有机酸盐缓冲溶液，包括乙酸-乙酸铵缓冲溶液，乙酸溶液；

所述的超滤膜的截留分子量小于10000 Da，纳滤膜的截留分子量为100-1000 Da；半透膜为截留分子量小于10000 Da的透析膜。

2.根据权利要求1所述的蜂毒溶血肽隐蔽溶血毒副作用的方法，其特征在于：天然蜂毒干粉含有45-55%的蜂毒溶血肽。

3.根据权利要求1所述的蜂毒溶血肽隐蔽溶血毒副作用的方法，其特征在于：所述凝胶过滤色谱柱分离具体操作为用隐蔽剂平衡凝胶过滤色谱柱，将天然蜂毒干粉或者采用生物固相合成法合成的蜂毒溶血肽粗肽用隐蔽剂溶解后，上样至凝胶过滤色谱柱中，用隐蔽剂作为洗脱液进行洗脱，紫外检测仪280nm检测，收集第一个峰，冷冻干燥。

4.根据权利要求1所述的蜂毒溶血肽隐蔽溶血毒副作用的方法，其特征在于：所述生物多肽固相合成法合成蜂毒溶血肽粗肽是采用FMOC保护的氨基酸固相合成法，以2%交联度的氯甲基树脂作载体，以C端为酰胺的多肽，按一级结构的氨基酸残基序列依次合成26个氨基酸残基组成的蜂毒溶血肽，在含质量百分比10%苯甲醚的无水氢氟酸中0℃下反应1h，反应完成后将蜂毒溶血肽从氯甲基树脂上切割下来，同时脱掉侧链的保护基而制得。