[发明专利]一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明公开了一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体及其应用，属于生物制药领域。所述靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体包括：依次连接的信号肽、靶向B细胞成熟抗原的单链抗体、加长的CD8α铰链区、加长的CD8α跨膜区、共刺激因子、胞内信号域、P2A连接肽、IL2信号肽和抗PD1单链抗体。该嵌合抗原受体可产生更少的细胞因子，安全性更高。

技术领域

本发明涉及生物制药领域，特别涉及一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体及其应用。

背景技术

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一。嵌合抗原受体（Chimeric AntigenReceptor，CAR）技术是近些年发展非常迅速的一种恶性肿瘤细胞治疗技术。相比于常规免疫细胞，嵌合抗原受体对效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性均较高。

嵌合抗原受体的发展经历了不同阶段，第二代和第三代嵌合抗原受体包括一个或者两个共刺激分子，临床上使用的共刺激因子包括：CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、ICOS、NKG2D以及B7-H3等等，这些共刺激因子在调节T细胞增殖、存活和抗肿瘤效应方面发挥重要作用。

目前，虽然CAR-T细胞可以有效的杀死肿瘤细胞，但同时也带来了诸如免疫因子风暴、神经毒性、脱靶效应和移植抗宿主反应等不良反应，严重时可导致患者死亡。因此，亟需一种安全的嵌合抗原受体用于治疗恶性肿瘤。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体及其应用。所述技术方案如下：

一方面，本发明实施例提供了一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括：依次连接的信号肽、靶向B细胞成熟抗原的单链抗体、加长的CD8α铰链区、加长的CD8α跨膜区、共刺激因子、胞内信号域、P2A连接肽、IL2信号肽和抗人PD1单链抗体，所述信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，所述靶向B细胞成熟抗原的单链抗体的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示，所述加长的CD8α铰链区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示，所述加长的CD8α跨膜区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:4所示，所述信号肽的第一端与所述靶向B细胞成熟抗原的单链抗体的第二端连接，所述胞内信号域的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:5所示，所述P2A连接肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示，所述IL2信号肽的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:7所示。

具体地，所述共刺激因子为CD27、CD28、4-1BB、OX40、CD30、CD40、ICOS、NKG2D和B7-H3中的至少一种。

进一步地，所述4-1BB的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:8所示。

进一步地，所述抗人PD1单链抗体包括：重链可变区、柔性肽和轻链可变区，所述重链可变区的第一端与所述IL2信号肽的第二端连接，所述重链可变区的第二端与所述柔性肽的第一端连接，所述柔性肽的第二端与所述轻链可变区的第一端连接，所述重链可变区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:9所示，所述柔性肽的核苷酸序列如序列表中SEQ IDNO:10所示，所述轻链可变区的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:11所示。

另一方面，本发明实施例提供了一种上述靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体的应用，所述应用包括：将所述嵌合抗原受体作为抗肿瘤药物。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明提供了一种靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体，本发明实施例提供的加长的CD8α铰链区和加长的CD8α跨膜区可以减少细胞因子风暴，从而使恶性肿瘤的治疗具有更好的安全性，进而为治疗恶性肿瘤展现出良好的应用前景。此外，该嵌合抗原受体中的靶向B细胞成熟抗原的单链抗体、加长的CD8α铰链区和加长的CD8α跨膜区，加长的CD8α铰链区能够准确识别BCMA抗原，这使得该嵌合抗原受体构建的CAR-T细胞可发挥更强的抗肿瘤效果，并能有效保证T细胞的抗肿瘤效果。