[发明专利]一种制备酪蛋白钙肽的方法

说明书

本发明涉及生物活性肽技术领域，特别涉及一种制备酪蛋白钙肽的方法，该方法将均质处理和复合酶A、复合酶B、复合酶C相结合，采用三步酶解法制备得到CCP，CCP得率的计算结果表明，采用本发明方法制备得到的CCP，得率为常规方法的两倍多；CCP的理化性质测定结果表明，与常规方法相比，采用本发明方法制备得到的CCP，N/P摩尔比更小，纯度更高，乳糖含量大幅度降低；苦味值的测定结果表明，与常规方法相比，采用本发明方法制备得到的CCP脱苦效果明显，口感好。可见，本发明不仅提高了酪蛋白钙肽的得率，而且所制备得到的酪蛋白钙肽N/P摩尔比低，味苦小，不容易变黏，质量得到了大大的改善。

技术领域

本发明涉及生物活性肽技术领域，特别涉及一种制备酪蛋白钙肽的方法。

背景技术

我国是钙摄入量严重缺乏的国家之一，寻找有效的补钙途径已成为当前重大的攻关领域。传统钙剂如葡萄糖酸钙、乳酸钙等，服用时需加维生素D，且钙吸收率不高，补钙效果欠佳。为了满足机体对钙的需要，除了食用富含钙的食物外，提高钙的吸收率是最有效的补钙措施。

来自牛乳酪蛋白的酪蛋白钙肽(Casein Calcium Pep-tide.CCP)是含有磷酸丝氨酸残基生物活性多肽，其中含有酪蛋白磷酸钙约占12.5％。CCP具有促进钙、铁等矿物质吸收的效果。 CCP和富含钙、铁等矿物质的食品配合使用，有助于矿物质的吸收。因此在保健食品、功能性食品和医药方面等将发挥着重要的作用。

CCP与酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides，CPP)一样，皆为含磷酸丝氨酸残基的多肽，与CPP相比，CCP在增加钙、铁等离子吸收方面与优质的CPP相当，但由于CCP分子量非常小，相比CPP就更易在水中溶解，且CCP在热稳定性方面性质明显要好于CPP， CCP的肽链相比短很多，也有利其氨基酸的吸收，因而更具有开发潜力。

由于CCP和CPP皆为含磷酸丝氨酸残基的多肽，而食品中CPP的研究相对CCP相对成熟，因此严格的CCP定性或定量的测定可参考测定。与CPP类似，CCP的生物活性由其分子中的氨基酸组成与排序或磷酸根的分布所决定，N/P摩尔比可反映CCP的纯度和磷酸根密度，随氮磷摩尔比降低，CCP阻止磷酸钙沉淀形成的最低有效浓度下降。也就是说CCP的 N/P越小，则CCP制品的纯度越高或磷酸基密度越大，即CCP制品中相对分子质量较小部分占的比例较大，结合钙的能力也较强。

但是目前生产CCP的方法由于特异性较差，分离得到的CCP质量较差，如纯度低，N/P 摩尔比较大，味苦、异味重，长时间存放容易变黏、稳定性差等。由于CCP纯度低，N/P摩尔比较大，会影响其在体内或体外阻止磷酸钙沉淀的效果；CCP长时间存放容易变黏会影响其保质期；CCP味苦、异味重会影响其口感效果。因此，有必要对CCP的制备方法进行探究，以提高其制备质量，改善其使用效果。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明提出了一种制备酪蛋白钙肽的方法，不仅提高了酪蛋白钙肽的得率，而且所制备得到的酪蛋白钙肽N/P摩尔比低，味苦小，不容易变黏，质量得到了大大的改善。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种制备酪蛋白钙肽的方法，包括以下步骤：

S1、往乳源酪蛋白(如牛乳酪蛋白、羊乳酪蛋白等)中添加水，搅拌混合成乳源酪蛋白浆液，控制水的添加量使乳源酪蛋白的底物浓度为10％～20％；

S2、采用高压均质机等设备对步骤S1中的乳源酪蛋白浆液均质处理1～2h；

S3、往步骤S2的乳源酪蛋白浆液中添加复合酶A，搅拌混匀，所述复合酶A由碱性蛋白酶和胰蛋白酶组成，所述复合酶A的添加量为乳源酪蛋白的1％～3％，调节pH为7.5～8.5，置于45～55℃下反应1～2h，反应后进行灭酶处理；

S4、采用高压均质机等设备对步骤S1中的乳源酪蛋白浆液均质处理15～30min；