[发明专利]一种制备酪蛋白钙肽的方法有效
| 申请号: | 201910966598.2 | 申请日: | 2019-10-12 |
| 公开(公告)号: | CN110922465B | 公开(公告)日: | 2022-07-08 |
| 发明(设计)人: | 彭维;刘飞 | 申请(专利权)人: | 广州医科大学;广州绿萃生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 广州正明知识产权代理事务所(普通合伙) 44572 | 代理人: | 成姗 |
| 地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 制备 蛋白 方法 | ||
1.一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、往乳源酪蛋白中添加水,搅拌混合成乳源酪蛋白浆液,控制水的添加量使乳源酪蛋白底物的浓度为10%~20%;
S2、将步骤S1中的乳源酪蛋白浆液均质处理1~2 h;
S3、往步骤S2的乳源酪蛋白浆液中添加复合酶A,搅拌混匀,所述复合酶A由碱性蛋白酶和胰蛋白酶按1.5~2:1的重量比复配而成,所述复合酶A的添加量为乳源酪蛋白的1%~3%,调节pH为7.5~8.5,置于45~55℃下反应1~2 h,反应后进行灭酶处理;
S4、将步骤S3经酶解后得到的酶解液均质处理15~30 min;
S5、往步骤S4中添加复合酶B,搅拌混匀,所述复合酶B由中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶按2:1.5:1:1的重量比复配而成,所述复合酶B的添加量为乳源酪蛋白的0.4%~1%,调节pH为6.8~7.2,置于45~55℃下反应20~60 min,反应后进行灭酶处理;
S6、将步骤S5经酶解后得到的酶解液均质处理10~15 min;
S7、往步骤S6中添加复合酶C,搅拌混匀,所述复合酶C由复合风味蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、乳糖酶、氨肽酶和羧肽酶按2:1.5:1.2:1:1的重量比复配而成,所述复合酶C的添加量为乳源酪蛋白的0.2%~0.8%,调节pH为6.0~7.0,置于45~55℃下反应20~40 min,反应后进行灭酶处理;
S8、将步骤S7中经酶解后得到的酶解液冷却至室温,将其pH调节至5-7,用超滤膜处理后,收集滤液;
S9、对滤液进行浓缩、干燥处理,收集沉淀物,沉淀物经粉粹处理后制得粉末状的酪蛋白钙肽。
2.根据权利要求1所述的一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,步骤S1中所述的底物浓度为13%~17%。
3.根据权利要求1所述的一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,步骤S2中所述的均质处理的条件为:80~90 ℃、10~30 MPa均质处理1~2 h;步骤S4中所述的均质处理的条件为:50~60 ℃、8~12 MPa均质处理15~30 min;步骤S6中所述的均质处理的条件为:50~60 ℃、8~12 MPa均质处理10~15 min。
4.根据权利要求1所述的一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,步骤S3、S5、S7中所述的灭酶处理为80~100℃下灭活15-30 min。
5.根据权利要求1所述的一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,所述超滤膜为聚砜超滤膜,所述超滤膜的膜分子量孔径为1000~10000道尔顿,所述超滤膜的进膜工作压力为0.30~0.50 MPa,出膜工作压力为0.08~0.20 MPa;所述超滤膜的工作温度为30℃~40℃。
6.根据权利要求1所述的一种制备酪蛋白钙肽的方法,其特征在于,步骤S9中所述的粉粹处理为70~90目筛粉粹处理。
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