[发明专利]一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺

说明书

本发明公开了一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺，属于海洋生物技术领域。本发明以河豚鱼皮为原料，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，研制开发出高体外抗氧化能力的河豚鱼皮多肽生物制品，其中混菌好氧发酵菌种主要包括黑曲霉和枯草芽孢杆菌。所得河豚鱼皮多肽具有较强的抗氧化能力，提取液可根据应用途径做浓缩、吸附干燥、醇析或树脂纯化等处理，满足在保健、食品、医药等领域的高效利用。该工艺技术简单高效、所得产品抗氧化能力和自由基清除能力强，产品稳定性强，生产成本低，易于工业化规模生产。

技术领域

本发明涉及一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺，尤其是一种利用微生物协同发酵联合酶解工艺制备高抗氧化能力的河豚鱼皮多肽生物制品，属于海洋生物技术领域。

背景技术

据史料记载，我国食用河豚鱼已有四千多年的历史，但是古人对食用河豚鱼也是褒贬不一，既有“甘美远胜西子乳，吴王当年未曾知”对河豚鱼肉美味的赞美，又有“庖煎苟失所，入喉为镆铘”对食河豚的规劝。由于河豚含有河豚毒素，每年都有因食用河豚丧命者，因此我国禁食河豚鱼。2016年，国家对红鳍东方鲀和暗纹东方鲀实行解禁，禁止了26年之久的河豚鱼可以被端上消费者的餐桌，这无疑推动了河豚养殖业的发展，也使人们能够一饱口福。随着河豚市场的开放和人工养殖无毒河豚鱼产业的发展，国内的河豚鱼需求将会逐渐增加，研究河豚鱼的营养价值及其副产物的综合利用对未来河豚鱼养殖及加工产业的发展有着重要意义

河豚鱼皮中含有丰富的胶原蛋白，胶原蛋白具有抗氧化、抗肿瘤、降血压、促进伤口愈合以及美容等功效，已被广泛用于食品、化妆品、医药行业。目前，以猪、牛等哺乳动物为来源的胶原蛋白受到口蹄疫、疯牛病等多种感染性疾病的威胁，鱼皮、鱼鳞胶原蛋白是替代它们的较好来源。河豚鱼皮中胶原蛋白含量较高，提取率也较其他哺乳动物胶原蛋白的提取率高。任俊凤测定的红鳍东方鲀鱼皮中蛋白质含量约为鱼皮干重的97.30%，胶原蛋白含量占总蛋白含量的90%。从河豚鱼皮中提取胶原蛋白肽，通过测定其对自由基OH·、DPPH·、O₂^—·的清除能力发现河豚鱼皮胶原蛋白肽具有很强的抗氧化性。

目前，我国对河豚鱼的研究利用还处于初级阶段，随着国家对河豚鱼限制的逐渐解除，对河豚鱼的研究将会更加全面。现有技术中，关于河豚鱼皮多肽及其在食品中的应用研究较少，如专利201510951376.5公开了一种复合发酵型河豚鱼皮保健饮料的生产工艺，选用玛河豚鱼皮、海参、枸杞、山楂、山药、红景天、甜叶菊、何首乌、刺五加、人参、肉苁蓉、葛根、甘草为原料通过复合发酵生产工艺生产豚鱼皮保健饮料，但该专利并未公开如何制备高纯度的河豚鱼皮多肽；专利201410078719.7公开了种基于壳寡糖修饰具有抗冻功能的鱼皮蛋白多肽复合物，主要是将鱼皮磨成浆，离心去掉脂肪；接着用超声波处理、复合酶酶解，再对酶解产物离心，取上清液；采用二步超滤上清液，得分子量5000～8000道尔顿的鱼皮蛋白多肽，再与壳寡糖反应，得鱼皮蛋白多肽复合物。比较上述文献可以发现，关于河豚鱼皮多肽的制备多采用复合酶解法，缺少复合微生物发酵关键技术的应用，尤其是缺乏提高河豚鱼皮多肽营养性的研究成为制约产业发展的关键瓶颈。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，满足河豚鱼皮多肽高效提取及高抗氧化能力应用，本申请提供一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，研制开发出高体外抗氧化能力的河豚鱼皮多肽生物制品，满足保健、医疗、食品等领域对河豚鱼皮多肽的应用需求，该工艺工艺简单高效、所得产品抗氧化能力和自由基清除能力强，生产成本低，易于工业化规模生产。

本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：

一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺，其特征在于具体包括如下步骤：

（1）匀浆：将河豚鱼皮粉碎，加水匀浆；

（2）酶解：向匀浆后的加入3000～5000U/g的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解4h；