[发明专利]一株二甲双胍单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

权利要求书

1.一株二甲双胍单克隆抗体杂交瘤细胞株Tcf 1A6，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2019年3月7日，保藏编号CGMCC No.17399。

2.二甲双胍单克隆抗体，其特征在于：它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.17399的二甲双胍单克隆抗体杂交瘤细胞株Tcf 1A6分泌产生。

3.权利要求2所述二甲双胍单克隆抗体的应用，其特征在于：用于食品安全检测中二甲双胍残留的分析检测。

4.二甲双胍完全抗原4cpMET-BSA的制备方法，其特征是步骤如下：称取1.8mg MET衍生物4cpMET，其中4cpMET与牛血清白蛋白BSA摩尔比为30：1，溶解于300μLN,N-二甲基甲酰胺DMF中，搅拌反应10min，充分溶解后，先后加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS 1.3mg和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC 2.1mg，室温活化反应4-6h，作为A液；取6mg BSA，用2mL 0.01M pH=9.0碳酸盐缓冲溶液CB溶解，作为B液；再逐滴将A液缓慢加入到B液中，室温偶联反应过夜；然后用0.01M PBS溶液透析，除去未反应的小分子半抗原，得到完全抗原4cpMET-BSA，并通过紫外吸收扫描方法进行鉴定；

4cpMET结构式为：

；命名为对二甲双胍苯甲酸。

5.根据权利要求4所述二甲双胍完全抗原4cpMET-BSA的制备方法，其特征是所述4cpMET的合成，合成路线如下：

；

①将化合物对醛基苯甲酸4-CBA 0.65 g于25 mL的圆底烧瓶中，加入纯水10mL、1M HCl溶液3mL于圆底烧瓶中；在磁力搅拌器搅拌下，向体系缓慢滴加DMF直至4-CBA完全溶解；

②加入1g盐酸二甲双胍MET·HCl溶解后，置于60℃水浴锅中磁力搅拌，接好冷凝装置回流过夜，产生白色浑浊；

③将反应液5000rpm离心10min，弃上清，将白色固体置于滤纸上，用纯水过滤洗涤3次，最后置于60℃烘箱烘干，即得到产物半抗原4cpMET。