[发明专利]用于质谱诊断地中海贫血症的特征蛋白质谱模型及其用途

说明书

本发明提供了一种检测地中海贫血症的特征蛋白片段组合物以及评价地中海贫血药物疗效或治疗方法效果评价的质谱模型。其中所述特征蛋白片段组合物的序列分别如SEQ ID No.1‑3所示。本发明的特征蛋白片段组合物或质谱模型，可用于地中海贫血症的诊断和筛查以及地中海贫血症的治疗方法和药物疗效评价，方法简单易于操作，准确性高，为地中海贫血症的诊断和筛查、治疗方法、药物疗效评价提供了新的方法和思路。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种检测地中海贫血症的特征血红蛋白的组合物或质谱模型，以及使用组合物或该模型，对血红蛋白异常可以进行快速鉴定以及对特征蛋白、尤其是血红蛋白片段相关疾病治疗方法或药物的疗效评价。同时，本发明还提供涉及该组合物或模型的诊断产品和用途。

背景技术

血红蛋白又称血色素，由2个β基因球蛋白与2个α基因球蛋白结合的杂四聚体复合物，是红细胞的主要组成部分，能与氧结合，运输氧和二氧化碳。血红蛋白含量能很好地反映贫血程度。血红蛋白病是世界上最大的一组遗传人单基因病，同时是地中海贫血与异常血红蛋白病的统称，其中地中海贫血对人类危害较大，且在中国南方较为常见，高发于广东、广西、海南等地[1]。最根本的特点是珠蛋白基因缺陷导致的血红蛋白中的珠蛋白肽链(即α-、β-、γ-、δ-中的任何一种珠蛋白链)有一种或者几种难以合成或者不能合成，最终致使血红蛋白其中的成分发生改变，甚至出现异常杂和纯四聚体Hb配对的聚合体。

重患者主要以慢性进行性溶血性贫血为主，轻者没有特别明显的临床症状[2]。依据珠蛋白链合成受抑制的不同，可分为α-地中海贫血、β-地中海贫血、γ-地中海贫血、δ-地中海贫血等四种，其中α-和β-地中海贫血最为普遍。仍目前地中海贫血患者治疗上来看，并无效果十分显著的手段，因此对该种疾病进行准确、科学的筛查以及诊断十分重要。

α型地中海贫血的发病原因为α链的合成缺失，β型地中海贫血的发病原因为β链的合成缺失。在α地中海贫血中，分为静止型、轻型、中间型、重型。静止型：红细胞形态正常，出生时脐带血中Hb Bart's含量为0.01～0.02，但3个月后即消失。轻型：红细胞形态有轻度改变，如大小不等、中央浅染、异形等；红纽胞渗透脆性降低；变性珠蛋白小体阳性；HbA2和HbF含量正常或稍低。患儿脐血Hb Bart's含量为0.034～0.140，于生后6个月时完全消失。中间型：外周血象和骨髓象的改变类似重型β地贫；红细胞渗透脆性减低；变性珠蛋白小体阳性；HbA2及HbF含量正常。出生时血液中含有约0.25Hb Bart's及少量HbH；随年龄增长，HbH逐渐取代HbBart's，其含量为0.024～0.44。包涵体生成试验阳性。重型：外周血成熟红细胞形态改变如重型β地贫，有核红细胞计数和网织红细胞计数明显增高。血红蛋白中几乎全是HbBart's，或同时有少量HbH，无HbA、HbA2和HbF。

β珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血)分为重型、轻型、中间型。(1)重型：外周血象呈小细胞低色素性贫血，红细胞大小不等，中央浅染区扩大，出现异形、靶形、碎片红细胞和有核红细胞、点彩红细胞、嗜多染性红细胞、豪-周氏小体等；网织红细胞正常或增高。骨髓象呈红细胞系统增生明显活跃，以中、晚幼红细胞占多数，成熟红细胞改变与外周血相同。红细胞渗透脆性明显减低。HbF含量明显增高，大多>0.40，这是诊断重型β地贫的重要依据。颅骨X线片可见颅骨内外板变薄，板障增宽，在骨皮质间出现垂直短发样骨刺。(2)轻型：成熟红细胞有轻度形态改变，红细胞渗透脆胜正常或减低，血红蛋白电泳显示HbA2含量增高(0.035～0.060)，这是本型的特点。HbF含量正常。(3)中间型：外周血象和骨髓象的改变如重型，红细胞渗透脆性减低，HbF含量为0.40～0.80,HbA2含量正常或增高。

由于目前对地中海贫血尚无有效的治疗方法，而夫妇携带的异常α、b珠蛋白基因可以遗传给子代，根据遗传情况，如果夫妇双方均为α地贫基因携带者，将会有25％的危险娩出一个重型α地贫儿，并会导致胎儿宫内水肿及死胎。目前，临床仅能通过产前筛查避免患儿的出生，而对α-地中海贫血纯合子胎儿则无有效的治疗措施。因此，进行产前诊断的目的就是要杜绝纯合子胎儿的出生，减少杂合子胎儿的出生。