[发明专利]GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂及其试剂盒在审
| 申请号: | 201910940770.7 | 申请日: | 2019-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN110609141A | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
| 发明(设计)人: | 黄海;马晓明;吴宛桦;王琼;李泽安 | 申请(专利权)人: | 中山大学孙逸仙纪念医院 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/574;G01N21/78 |
| 代理公司: | 52002 贵阳东圣专利商标事务有限公司 | 代理人: | 袁庆云 |
| 地址: | 510030 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 前列腺癌 预后检测 工作液 试剂盒 过氧化物酶溶液 多克隆抗体 生物素标记 检测试剂 试剂组成 链霉菌 免疫羊 生物素 羊抗兔 血清 二抗 兔源 一抗 复发 检测 预测 | ||
本发明公开了一种GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂及其试剂盒,其试剂组成如下(20人份):H2O21ml、非免疫羊血清工作液1ml、一抗:兔源抗GLTSCR1多克隆抗体10μl、二抗:生物素标记的羊抗兔的IgG工作液1ml、链霉菌抗生物素‑过氧化物酶溶液1ml、DAB显色剂2‑3ml。本GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂盒,包含检测GLTSCR1检测试剂。本发明的试剂能准确预测前列腺癌复发。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体来说涉及的是一种GLTSCR1前列腺癌预后检测的试剂,同时还涉及该GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂盒。
背景技术
前列腺癌是全球男性生殖系统最常见的恶性肿瘤疾病,对老年男性而言,其发病率在所有恶性肿瘤中居第二位。不同国家的前列腺癌的发病率存在较大差异。美国的前列腺癌发病率已经超越肺癌,成为发病率最高的男性恶性肿瘤。而我国的前列腺癌发病率虽然远低于欧美国家,但近年来呈明显的上升趋势。当前对于局部前列腺癌主要治疗方法主要为手术治疗。然而,手术治疗后仍然会有部分患者会发生局部复发和(或)远处转移。对于发生临床复发的患者,其前期可能会发生生化复发。目前可以通过PSA预测作为前列腺癌的生化复发。尽管PSA的敏感性较强,但仍存在不足,其无法准确预测临床复发,而且无法预测患者是否会发生转移。而且其特异性不足,研究显示前列腺增生、前列腺炎、急性尿潴留等多种疾病均可引起血浆中PSA增多。因此,开发敏感性高、特异性强、结果稳定的肿瘤标记物是预测前列腺癌复发的重点研究向。
胶质瘤肿瘤抑制候选区基因1(glioma tumor suppressor candidate regiongene 1,GLTSCR1)与多种癌症的发生和进展有一定关系。目前自噬对于多种癌症的促进作用都已得到证实。自噬过程中有一关键蛋白名为MAP1S(Microtubμle-associated protein1S),是微管相关蛋白家族1中的成员,能够调控有丝分裂进程。目前尚未见GLTSCR1在前列腺癌中的表达及生物学作用方面的研究。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能准确检测前列腺癌复发的GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂。
本发明的另一目的在于提供包含该GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂的试剂盒。
本发明的一种GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂,其试剂组成如下(20人份):
本发明的一种GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂盒,包含检测GLTSCR1检测试剂。
本发明的一种GLTSCR1前列腺癌预后检测试剂盒,使用方法如下:
(1)将经拷片脱蜡、水化和抗原修复后的切片置于孵育盒中,用阻水笔把组织圈住,以免滴加后的试剂扩散,吸水纸将切片上的水稍吸去,不要碰到组织,加H2O2 50μl覆盖组织后室温孵育30min,以阻断内源性过氧化物酶的活性;
(2)PBS冲洗3min,重复3次;
(3)吸水纸将切片上的PBS液稍吸去,滴加50μl非免疫羊血清工作液,室温下孵育15分钟;
(4)轻轻甩去血清,不漂洗,滴加兔源抗GLTSCR1多克隆抗体:PBS=1:100的一抗稀释液50μl,室温下孵育60分钟或4℃过夜;
(5)PBS冲洗5min,重复3次;
(6)吸水纸将切片上的PBS液稍吸去,滴加50μl二抗:生物素标记的羊抗兔的IgG工作液,室温下孵育20分钟;
(7)PBS冲洗5min,重复3次;
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