[发明专利]一种灵芝糖肽及其制备方法

说明书

本发明公开了一种灵芝糖肽及其制备方法。本发明以灵芝为原料，纯水回流提取后过滤，收集滤液浓缩，加入高醇至沉淀析出，静置离心，取沉淀加入少量甲醇水混合溶剂溶解样品，离心除杂，取上清液经MCI柱层析，甲醇和水不同比例梯度洗脱，收集洗脱剂，浓缩真空干燥粉碎得到灵芝糖肽。本发明制备的灵芝多肽具有抑制乙酰胆碱酯酶的活性的作用，其中多糖含量为23.52％～28.15％，蛋白质含量58.99％～62.11％。本发明工艺简单，易于操作，MCI柱层析可反复多次使用。本发明所述工艺易于工业化生产。

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种灵芝糖肽及其制备方法。

背景技术

赤芝是担子菌纲，多孔菌目，多孔菌科，真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.exFr.)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang的干燥子实体，具有补气安神，止咳平喘的功效，用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳气短等症。灵芝含有丰富的有效成分，其中包括多糖(肽)类，三萜类，蛋白质类，腺苷类、生物碱类及甾醇类，具有极高的药用价值。

糖肽是一种结合蛋白质的多醣体，主要成分是含有蛋白质的葡聚糖，多糖由β-(1，3)或β-(1，3)(1，6)葡聚糖组成，其具有抗肿瘤，保肝解毒和提高机体免疫力等功能。

现有的专利申请号CN106265773A的制备方法是将灵芝孢子粉采用浓醇提取、稀醇提取、乙醚脱脂，除杂脱色和树脂纯化步骤，得到灵芝孢子粉糖肽。该专利生产工艺繁琐，不易操作，用到的乙醚溶剂极易挥发，不利于大规模生产。

现有技术CN108047318A将灵芝粉碎、水浸泡提取获得灵芝水提取液，通过膜透析和Bio-GL，P-10柱色谱分离纯化获得多糖肽对照品。该专利利用液相色谱制备糖肽，不利于大规模生产。

现有技术CN1552732A通过氨水调节pH至碱性水提云芝子实体，过滤浓缩，干燥粉碎，加水溶解，通过阳离子树脂脱去重金属，得到云芝糖肽。该专利只脱除了重金属，未进行糖肽的纯化和活性测试。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服背景技术的技术缺陷，提供一种灵芝糖肽及其制备方法。本发明制备的灵芝多肽具有抑制乙酰胆碱酯酶的活性的作用，其中多糖含量为23.52％～28.15％，蛋白质含量58.99％～62.11％。本发明工艺简单，易于操作，MCI柱层析可反复多次使用。本发明所述工艺易于工业化生产。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：

一种灵芝糖肽的制备方法，包括如下步骤：

(1)提取浓缩：取灵芝药材粗粉，每次加入纯水的量分别是所述灵芝药材粗粉质量的8～12倍，加热回流提取的时间为1.5～2.5小时，共提取2～3次，滤布过滤，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；

(2)醇沉：将步骤(1)所述浓缩液不断搅拌，缓慢加入95％乙醇至沉淀析出，静置，离心过滤，收集乙醇沉淀部分，上清液再次缓慢加入95％乙醇，同法操作，收集乙醇沉淀，合并两次沉淀，备用；

(3)柱层析：在步骤(2)所述两次沉淀中加入15％～30％的甲醇-水混合溶液至沉淀溶解，过滤，滤液经MCI柱层析，15％～30％甲醇-水混合溶液洗脱，50％～70％甲醇-水混合溶液解析，收集50％～70％甲醇-水解析液，减压浓缩，真空干燥粉碎即得灵芝糖肽。

优选地，所述步骤(1)中，所述灵芝为赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang。

优选地，所述步骤(1)中，所述加热回流提取的温度为150℃。

优选地，所述步骤(1)中，所述滤布的目数为200～300目。