[发明专利]一种含EPA微拟球藻藻油的制备方法

权利要求书

1.一种含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将微拟球藻细胞培养液在转速4000~8000 r/min的离心机中离心20 ~40分钟，得到微拟球藻微脱水液，所述微拟球藻微脱水液的含水量范围为2~10%；

步骤二、再对所述微拟球藻微脱水液进行喷雾干燥处理，得到微拟球藻干藻粉；

步骤三、将所述微拟球藻干藻粉与脱色液混合，在30~80℃下反应60 ~240分钟，得到微拟球藻脱色液；

步骤四、将所述微拟球藻脱色液低温真空蒸发除去乙醇，即得微拟球藻脱色干藻粉；

步骤五、将所述微拟球藻脱色干藻粉进行亚临界萃取，制得含EPA微拟球藻藻油。

2.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述微拟球藻细胞培养液制备方法如下：将浓度为20.0g/L 的NaCl、浓度为0.6 g/L 的KCl、浓度为4g/L的Na₂SO₄、浓度为0.2g/L 的NaHCO₃、浓度为0.1g/L 的KBr、浓度为0.02g/L 的H₃BO₃、浓度为0.004 g/L 的NaF、浓度为10g/L 的MgCl₂、浓度为1.5 g/L 的CaCl₂混合物，在3000~10000lux光照且25-30℃温度下，通入含CO₂浓度为2~10%的混合空气，培养5~8天，即得微拟球藻细胞培养液。

3.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述步骤二中喷雾干燥条件为：进风温度120~160℃，出风温度60~80℃。

4.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述步骤三中脱色液的制备方法为：将浓度100%乙醇与浓度0.5~3%的NaOH溶液按体积比10:3~7混匀，即得脱色液。

5.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述步骤三中将所述微拟球藻干藻粉与脱色液按重量比0.5~5.0:30~50混合。

6.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述步骤四中将所述微拟球藻脱色液在温度40~50℃、压力-0.12~-0.05Mpa条件下低温真空蒸发4~6小时除去乙醇。

7.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述步骤五中亚临界萃取包括：

将微拟球藻脱色干藻粉与丁烷按重量比1:20混合，置于反应釜中密封，向反应釜中通入氮气至1~1.2MPa，加热到230~280℃，加压到8~12 MPa，反应时间10~40分钟，得到临界丁烷提取的微拟球藻藻油；将微拟球藻脱色干藻粉与丙酮按重量比1:20混合，置于反应釜中密封，向反应釜中通入氮气至1.2~1.6MPa，加热到220~260℃，加压到10~15 MPa，反应时间20~50分钟，得到临界丙酮提取的微拟球藻藻油；将微拟球藻脱色干藻粉与甲醇按重量比1:20混合，置于反应釜中密封，向反应釜中通入氮气至1.4~1.8MPa，加热到250~300℃，加压到12~15 MPa，反应时间15~60分钟，得到临界甲醇提取的微拟球藻藻油。

8.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述临界丁烷提取的微拟球藻藻油中脂质提取率为10~20%，磷脂含量为5~10%，中性酯含量为10~20%，糖脂含量为50~60%，脂质中EPA含量为10~17%。

9.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述临界丙酮提取的微拟球藻藻油中脂质提取率为1~10%，磷脂含量为10~15%，中性酯含量为50~60%，糖脂含量为5~10%，脂质中EPA含量为5~10%。

10.如权利要求1所述的含EPA微拟球藻藻油的制备方法，其特征在于，所述临界甲醇提取的微拟球藻藻油中脂质提取率为10~20%，磷脂含量为40~50%，中性酯含量为10~20%，糖脂含量为15~20%，脂质中EPA含量为15~26%。