[发明专利]一种夹心法抗原检测方法及试纸在审
申请号: | 201910921772.1 | 申请日: | 2019-09-26 |
公开(公告)号: | CN110672841A | 公开(公告)日: | 2020-01-10 |
发明(设计)人: | 宋禹 | 申请(专利权)人: | 科赫生物科技(北京)有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558 |
代理公司: | 11701 北京众泽信达知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 王晓红 |
地址: | 300450 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 荧光原料 检测抗体 活化 制备 包被抗体 混合溶液 乙醇溶液 微球 摇匀 溶解 标记检测抗体 混合溶液中 上清液排除 超声分散 待测样品 第二试剂 第一试剂 交联抗体 抗原检测 荧光信号 超声波 夹心法 试管 烧杯 试纸 条带 团聚 | ||
1.一种夹心法抗原检测方法,其特征在于,包括:
通过第一试剂向乙醇溶液溶解,制备第一溶液;以及
通过第二试剂向乙醇溶液溶解,制备第二溶液;
将所述第一溶液、第二溶液与荧光原料液进行混合,得到第一混合溶液;
将所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超声波对所述第一混合溶液进行超声分散处理,得到活化荧光原料液;
用所述活化荧光原料液标记检测抗体;
根据标记后的检测抗体,制备包被抗体;
将待测样品与所述检测抗体和所述包被抗体结合;
收集所述检测抗体发出的荧光信号强度。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在通过第一试剂向乙醇溶液溶解,制备第一溶液之前,所述方法还包括:
将所述荧光原料进行超声分散;
向分散后的荧光原料加入超纯水进行稀释,得到所述荧光原料液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在将所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超声波对所述第一混合溶液进行超声分散处理,得到活化荧光原料液之前,所述方法还包括:
将所述第一混合溶液进行超声波超声处理;
将超声处理后的第一混合溶液进行离心。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将所述第一溶液、第二溶液与荧光原料液进行混合,得到第一混合溶液包括:
将第一溶液加入所述荧光原料液,并充分混合至均匀,得到第二混合溶液;
向所述第二混合溶液中加入所述第二溶液,并充分混合至均匀,得到第三混合溶液;
将所述第三混合溶液在常温下静置第一预设时间,得到所述第一混合溶液。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将所述第一混合溶液中的上清液排除,并利用超声波对所述第一混合溶液进行超声分散处理,得到活化荧光原料液包括:
倒掉所述第一混合溶液中的上清液,得到第四混合溶液;
向所述第四混合溶液中加入超纯水,得到第五混合溶液;
将所述第五混合溶液进行超声波超声处理,得到所述活化荧光原料液。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,用所述活化荧光原料液标记检测抗体包括:
将所述检测抗体加入所述活化荧光原料液中;
将牛血清蛋白加入所述活化荧光原料液中,得到被所述活化荧光原料液标记好的检测抗体。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在将所述检测抗体加入所述活化荧光原料液中之后,所述方法还包括:
将加入了检测抗体的所述活化荧光原料液静置第二预设时间;
用超声波超声处理静止了第二预设时间后的活化荧光原料液,并在超声处理后继续静置第三预设时间。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将牛血清蛋白加入所述活化荧光原料液中,得到被所述活化荧光原料液标记好的检测抗体包括:
向加入了检测抗体的所述活化荧光原料液中加入牛血清蛋白,并封闭第四预设时间;
将封闭所述第四预设时间后的所述活化荧光原料液进行离心处理;
向经过离心处理后的所述活化荧光原料液加入保存液。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,根据标记后的检测抗体,制备包被抗体包括:
用所述检测抗体的抗原制备包被液;
根据所述包被液,制作包被垫,形成固相包被抗体。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述荧光信号强度与所述待测样品中的抗原数量成线性正比关系。
11.一种夹心法抗原检测试纸,其特征在于,根据上述权利要求1至10制作而成,用于检测待测样品中抗原的数量。
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