[发明专利]一种丝素蛋白冷冻海绵的制备及应用方法在审
申请号: | 201910918746.3 | 申请日: | 2019-09-26 |
公开(公告)号: | CN110591143A | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 敖英芳;孙牧旸;胡晓青 | 申请(专利权)人: | 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院) |
主分类号: | C08J9/28 | 分类号: | C08J9/28;C08J9/36;C08L89/00 |
代理公司: | 11252 北京维澳专利代理有限公司 | 代理人: | 王立民;江怀勤 |
地址: | 100191 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 丝素蛋白 海绵 多孔海绵 低温冷冻保存 丝素蛋白溶液 玻璃化转变 低温恒温箱 低温冷冻 化学交联 设施要求 无添加剂 有机溶剂 制备工艺 交联剂 无毒性 交联 解冻 冷冻 应用 | ||
1.一种丝素蛋白冷冻海绵的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将蚕茧加入到煮沸之后的0.01-0.03mol/L碳酸钠溶液中,保持煮沸状态并搅拌溶解20-60min;
2)将步骤1)中的固体物质取出,水洗并在室温下烘干,得到丝素蛋白;
3)按丝素蛋白与溴化锂的质量比为1:4称取溴化锂,并配备9.3mol/L的溴化锂水溶液;
4)将溴化锂水溶液加入到放置有丝素蛋白的容器内,令溴化锂水溶液完全覆盖所述丝素蛋白,在50-70℃下搅拌3-5h;
5)将获得的黄褐色粘稠溶液进行透析,将收集液离心处理,保留上清液;
6)将上清液利用液氮速冻并进行冷冻干燥,得到可溶于水的海绵状丝素蛋白。
2.根据权利要求1所述的丝素蛋白冷冻海绵的制备方法,其特征在于,步骤1)中9.3mol/L溴化锂溶液的配制为,先计算好溴化锂溶液的体积,称取60%的水冰浴,边搅拌边将溴化锂缓慢加入水中,待溴化锂完全溶解后将水补充至计算值。
3.根据权利要求1所述的丝素蛋白冷冻海绵的制备方法,其特征在于,步骤1)中透析的方法为,每12h换一次水,三天后收集透析液在4℃离心转速为9000rpm离心两次,收集上清液。
4.一种丝素蛋白冷冻海绵的应用方法,其特征在于,利用上述权利要求1至3中任一项的丝素蛋白冷冻海绵,包括以下步骤:
1)将丝素蛋白海绵溶解成需要的丝素蛋白水溶液或丝素蛋白盐溶液;
2)通过差式热实验对所述丝素蛋白水溶液或所述丝素蛋白冷盐溶液的玻璃化转变温度进行测量,得到相变温度区间,温度区间通常从0度到-20度不等;
3)将所述丝素蛋白水溶液或所述丝素蛋白盐溶液导入模具中,放入低温恒温箱中,在步骤2)测定的相变温度区间中进行冷冻保存12-72小时,使其充分变性;
4)取出解冻即可应用。
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