[发明专利]一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡及其制备方法

说明书

本发明涉及一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人总Tau蛋白单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。本发明所提供的快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡，其可用于血清、血浆和全血的检测，以用于阿尔兹海默病的诊断。

技术领域

本发明属于体外诊断领域，涉及一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡及其制备方法。

背景技术

微管系统是神经细胞的骨架成分，由微管蛋白和微管相关蛋白组成，总Tau蛋白是含量最高的微管相关蛋白。许多神经退行性疾病，包括阿尔兹海默病(Alzheimergdisease，AD)、帕金森病(Parkinson gdisease，PD)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(Amyotro.phiclateral sclerosis，ALS)、朊毒体病(prion disease)等都有一个共同的病理特征，即由于微管相关蛋白Tau的聚集，形成神经原纤维缠结(neurofibrillary，NFTs)异常沉积于脑内，进而产生神经退行性变，这类疾病统称为Tau病变。

总Tau蛋白是神经元缠结的组成蛋白，1993年有报道显示，AD患者CSF中的总Tau蛋白水平升高，比正常人高2～3倍。ANDREASEN等比较了2400例AD患者和1250名健康者发现，总Tau蛋白诊断AD的敏感度约82.0％，特异性为88.0％。AD患者的总Tau蛋白呈现异常磷酸化，失去了使微管蛋白聚集形成微管的能力，并且总在神经元纤维缠结处聚集。越来越多的证据显示，CSF中磷酸化的总Tau蛋白(hyperphosphorylated Tau，p-Tau)可以将AD患者与健康者、额颞叶痴呆、路易体痴呆、血管性痴呆区分诊断。

但是，CSF取样的诸多局限性限制了总Tau蛋白的应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人总Tau蛋白单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述试纸条还包括PVC板，所述PVC板上固定有依次连接的样品垫、标记物垫、包被垫及吸水垫，所述包被垫上依次设有检测线及质控线，所述样品垫和标记物垫连接为一体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述包被垫靠近检测线的一端连接有标记物垫，靠近质控线的一端连接有吸水垫。

在本发明的一个具体方案中，其中所述标记物垫上包被有另一株鼠抗人总Tau蛋白单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球，所述另一株鼠抗人总Tau蛋白单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球的摩尔比为1:0.2～4。

在本发明的一个具体方案中，其中所述快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡还包括用于卡设试纸条的卡壳。

在本发明的一个具体方案中，其中所述卡壳包括：

底槽，其连接于所述PVC板；

上盖，其连接于所述底槽，所述上盖上设置有用于向所述样品垫上加样的加样孔；

观察窗，其设置于上盖上并用于检测线和质控线的数据采集。

一种快速检测总Tau蛋白的免疫层析检测卡的制备方法，包括以下步骤：

1)包被垫的制备：将一株鼠抗人总Tau蛋白单克隆抗体和羊抗兔多克隆抗体分别包被到硝酸纤维素膜上，干燥备用；