[发明专利]一种抗体融合蛋白及其制法和在抗肿瘤中的应用

权利要求书

1.一种能同时阻断HER2和VEGFR信号通路的抗体融合蛋白，其特征在于，其包含抗HER2单克隆抗体IgG和VEGFR1的D2结构域，VEGFR1的D2结构域通过肽接头L连接至IgG重链的C末端。

2.根据权利要求1所述的抗体融合蛋白，其特征在于，所述IgG的重链包含互补决定区HCDR1-3，其中HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述IgG的轻链包含互补决定区LCDR1-3，其中LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，LCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示，LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。

3.根据权利要求1所述的抗体融合蛋白，其特征在于，所述IgG的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。

4.根据权利要求1所述的抗体融合蛋白，其特征在于，所述肽接头L的氨基酸序列如SEQID NO：9所示。

5.根据权利要求1所述的抗体融合蛋白，其特征在于，所述抗体融合蛋白的重链氨基酸序列如SEQ ID NO：10所述，其轻链氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示。

6.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码如权利要求1-5任一所述的抗体融合蛋白。

7.如权利要求6所述的核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码抗体融合蛋白的重链的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示，编码其轻链的核苷酸序列如SEQ ID NO：13所示。

8.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求6或7任一所述的核苷酸分子。

9.根据权利要求8所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体选自pDR1，pcDNA3.4(+)，pDHFR或pTT5。

10.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求8所述的表达载体。

11.根据权利要求10所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是真核细胞，优选自CHO细胞和293E细胞。

12.一种如权利要求1-5任一项所述的抗体融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

a)在表达条件下，培养如权利要求10-11任一项所述的宿主细胞，从而表达能能同时阻断HER2和VEGFR信号通路的抗体融合蛋白；

b)分离并纯化步骤a)所述的抗体融合蛋白。

13.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1-5任一项所述的抗体融合蛋白和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

14.权利要求1-5任一项所述的抗体融合蛋白、或权利要求13所述的药物组合物在制备药物中的应用，其特征在于所述药物用于治疗肿瘤。