[发明专利]一种IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法

权利要求书

1.一种IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、将试剂盒打开，取出试剂盒内部的酶标板、说明书和分别呈装有R1试剂与R2试剂的试剂管，并与试剂盒内说明书核对试剂管的数量与名称是否正确；

S2、通过滴管取用血清样品与试剂R1加入酶标板上的酶标板条中混匀；

S3、随后将酶标板放入温箱中孕育一段时间后取出酶标板；

S4、取用混有包被鼠抗人IV型胶原蛋白单克隆抗体胶乳颗粒的试剂R2通过滴管注入至酶标板中的样品中并混匀；

S5、将酶标板继续放入温箱中孕育后取出，调节全自动生化分析仪至测定波长并测量此时酶标板内的样品，记录此时的吸光度为A1；

S6、将酶标板放入温箱中孕育一端时间后取出，使用全自动生化分析仪测量此时酶标板中的样品，记录此时吸光度为A2；

S7、通过ΔA=A2-A1的公式得出ΔA的数值，随后根据ΔA在全自动生化分析仪中建立的校准曲线上的位置，即可求得相应的IV型胶原蛋白在血清样品中的浓度。

2.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S2中血清样品的剂量为20μl，试剂R1的剂量为180μl，步骤S4中的试剂R2的计量为60μl。

3.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S3与步骤S5中酶标板在温箱中孕育的温度均为37℃，且步骤S3中酶标板在温箱中孕育的时间控制在3~5分钟内。

4.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S6中酶标板在温箱中孕育的时间为4分30秒。

5.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S5中自动生化分析仪调节的主波波长为600nm，副波波长为700nm，此时反应温度为37℃。

6.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S1中试剂R1为浓度20mmol/L、PH值7.4的磷酸盐缓冲液，试剂R2为试剂R1与包被鼠抗人IV型胶原蛋白单克隆抗体的胶乳颗粒的混合物，且包被鼠抗人IV型胶原蛋白单克隆抗体的胶乳颗粒在试剂R2中的浓度为0.6%。

7.根据权利要求1所述的IV型胶原蛋白检测试剂盒的检测方法，其特征在于：步骤S7中全自动生化分析仪中的校准曲线矫正类型为Spline，矫正方法为多点定标。