[发明专利]用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物及其制备方法在审
申请号: | 201910913791.X | 申请日: | 2019-09-25 |
公开(公告)号: | CN110632324A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 谭瑞政 | 申请(专利权)人: | 百盛(广州)生物制品有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;C08G73/02 |
代理公司: | 44606 广州海石专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 罗伟添 |
地址: | 510000 广东省广州市南沙区珠江街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚酰胺胺 二抗 检测系统 制备 免疫球蛋白 树枝状 检测灵敏度 实质性特点 酰胺化反应 蛋白分子 骨架结构 市场应用 聚合物 低成本 多聚物 酶蛋白 蛋白 | ||
1.用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物,其特征在于,所述聚酰胺胺结构多聚物包括树枝状聚酰胺胺2-13%,结合酶75-95%和免疫球蛋白2-13%,其结构式为:
其中,n≥1。
2.根据权利要求1所述的用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物,其特征在于,所述树枝状聚酰胺胺的分子量为(1500-60000U),其表面修饰基团为-NH2,-NH2基团的数量为32-128。
3.根据权利要求2所述的用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物,其特征在于,所述结合酶的分子量为(25000-44000U),RZ值为2.1-3.5。
4.根据权利要求3所述的用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物,其特征在于,所述免疫球蛋白的分子量为(70000-100000U)。
5.根据权利要求4所述的用于二抗检测系统的聚酰胺胺结构多聚物,其特征在于,所述结合酶优选为过氧化物酶,所述免疫球蛋白优选为羊抗兔免疫球蛋白。
6.一种制备权利要求1至5任一所述的聚酰胺胺结构多聚物的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)、称取结合酶,溶解到碳酸氢钠溶液中,然后添加适量二苯基亚砜溶液,反应1小时,反应后的溶液用交联葡聚糖凝胶柱进行过滤、分析、纯化,纯化液为碳酸氢钠溶液,收集深色的过滤液;
(2)、将(1)步收集到的过滤液,进行低温离心浓缩,取其浓缩液装于试管中,2-8℃冷藏备用,在浓缩液中,加入树枝状聚酰胺胺,于30℃下低速搅拌反应24小时,然后将上述的反应液,通过碳酸氢钠溶液在交联葡聚糖凝胶柱上进行过滤、分析、纯化,收集深色物质溶液;
(3)、将(2)步纯化后的深色物质溶液,进行低温离心浓缩,取其浓缩液装于试管中,加入二苯基亚砜,反应4小时,然后用PBS溶液将反应溶液在交联葡聚糖凝胶柱上进行过滤、分析、纯化,收集深色物质,低温浓缩备用;
(4)、将免疫球蛋白溶解到PBS溶液中,充分搅拌均匀,加入(3)步的浓缩液,磁力搅拌均匀,孵育48小时后,加入抗原封闭剂牛血清白蛋白,充分搅拌均匀,最后合成的聚酰胺胺结构多聚物存储于2—8℃备用。
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