[发明专利]一种生物组织基质材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种生物组织基质材料的制备方法，其特征在于，包括对动物源性组织材料依次进行：

1）动物组织清洗；

2）脱细胞处理；及

3）脱细胞处理后清洗；

其中，所述脱细胞处理后清洗的步骤包括使用清洗液进行清洗，所述清洗液的主要成分包括：

a）清洗剂；

b）碱性盐、中性无机盐中的一种或几种；及

c）碱性pH调节剂，其用量足以将所述清洗液的pH调至7.5-12；

所述清洗剂为离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂中的一种或几种；

所述清洗液中所述碱性盐的浓度为0.01M-2M；所述清洗液中该中性无机盐的浓度为0.01M-2M；

在使用所述清洗液清洗之后，还包括进行脱脂肪处理的步骤。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1）动物组织清洗包括异种组织的去病毒处理，目标组织的获取和清洗，其中去病毒处理为用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡1-5小时，或在-80℃环境中冷冻1-10小时；该过氧乙酸-乙醇溶液中过氧乙酸与乙醇的体积比为1:2~1:10；和/或，

步骤2）脱细胞处理包括使用0.05%-2.5%的胰蛋白酶或0.25%-2.5%的胰岛素酶浸泡或者震荡处理8-24小时。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2）脱细胞处理包括使用0.05%-2.5%的胰蛋白酶或0.25%-2.5%的胰岛素酶浸泡或者震荡处理14-18小时。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述清洗剂选自SDS、SDC、TritonX-100中的一种或几种。

5.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述碱性盐包含但不限于碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、磷酸钠、硫酸钠、乙酸钠、硫化钠中的一种或几种；或，

所述中性无机盐为氯化钠、氯化钾、硝酸钠、硫酸钾中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述清洗液中所述碱性盐的浓度为0.3-1M；或，

所述清洗液中所述中性无机盐的浓度为0.3-1M。

7.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述清洗液选自以下任一种：

i）所述清洗液中含有：质量百分比浓度0.1-1.5%的TritonX-100，浓度0.1-1M的碳酸钠；还含有氢氧化钠，通过氢氧化钠的添加量调节该清洗液的pH为7.5-10；或，

ii）所述清洗液中含有：质量百分比浓度0.1-2%的SDS，浓度0.01-2M的氯化钠；还含有氢氧化钙，通过氢氧化钙的添加量调节该清洗液的pH为8-10；或，

iii）所述清洗液中含有：质量百分比浓度0.1-1%的SDC，浓度0.08-1.5M的硝酸钠；还含有氢氧化钾，通过氢氧化钾的添加量调节该清洗液的pH为8-10。

8.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述清洗液选自以下任一种：

i）所述清洗液中含有：质量百分比浓度0.2%的TritonX-100，浓度0.5M的碳酸钠；还含有氢氧化钠，通过氢氧化钠的添加量调节该清洗液的pH为9；或，

ii）所述清洗液中含有：质量百分比浓度1%的SDS，浓度0.8M的氯化钠；还含有氢氧化钙，通过氢氧化钙的添加量调节该清洗液的pH为10；或，

iii）所述清洗液中含有：质量百分比浓度1%的SDC，浓度0.5M的硝酸钠；还含有氢氧化钾，通过氢氧化钾的添加量调节该清洗液的pH为8。

9.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述脱脂肪处理所使用的脱脂溶液选自甲醇-氯仿混合溶液，异丙醇，石油醚中的一种或几种；

或者，在所述脱脂肪处理之后还包括使用纯化水和/或0.9%氯化钠溶液进行再次清洗。