[发明专利]一种耐干旱玉米的遗传转化方法

说明书

本发明公开了一种耐干旱玉米的遗传转化方法，包括如下步骤：S1.耐干旱基因或耐干旱诱导基因的选择与培养；S2.测量成熟玉米种子的生理吸胀曲线，吸胀阶段用含有S1中的耐干旱基因或耐干旱诱导基因的菌液浸泡；S3.筛选出S2中玉米种子不发生损伤的最大吸胀种子；S4.对S3中筛选出的玉米种子用发根农杆菌震荡侵染19.5‑20小时至种子发芽；S5.选取发了芽的苗子，清除其上发根农杆菌，并对该苗子用酒精消毒后，转入培养基进行培养，同时在高温光照下培养5‑7d，获得耐干旱玉米植株；S6.对S5中获得植株进行分子检测。采用本发明能产出高产率的耐干旱玉米，且玉米抗旱效果好。

技术领域

本发明涉及生物遗传转化领域，具体是一种耐干旱玉米的遗传转化方法。

背景技术

玉米的生长需要水分的供应，干旱条件下，细胞液泡会发生质壁分离，最终导致植物死亡，同时，作物体内养分的运输需要水分协助运输，缺水会导致运输量减少，从而减低养分的有效性。而玉米减产会影响收成乃至影响人们的生活，故需要研发出一种耐干旱玉米，提高其耐旱性，即使在干旱的季节也能将玉米的产量维持在一个正常水准。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种耐干旱玉米的遗传转化方法，以至少达到得到含有目的基因的耐干旱玉米。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种耐干旱玉米的遗传转化方法，包括如下步骤：S1. 耐干旱基因或耐干旱诱导基因的选择与培养；S2. 测量成熟玉米种子的生理吸胀曲线，吸胀阶段用含有S1中的耐干旱基因或耐干旱诱导基因的菌液浸泡；S3.筛选出S2中玉米种子不发生损伤的最大吸胀种子；S4.对S3中筛选出的玉米种子用发根农杆菌震荡侵染19.5-20小时至种子发芽；S5.选取发了芽的苗子，清除其上发根农杆菌，并对该苗子用酒精消毒后，转入培养基进行培养，同时在高温光照下培养5-7d，获得耐干旱玉米植株；S6.对S5中获得植株进行分子检测。

优选的，所述S1中，所述耐干旱诱导基因选择ZmBTF3b，所述干旱诱导表达基因ZmBTF3b编码蛋白含有169个氨基酸,具有新生多肽复合体保守结构域。

优选的，所述S2中，成熟玉米种子生理吸胀曲线的测量方法为取7份等量的成熟玉米种子，每隔4.5小时取一份浸泡到水中，分别浸泡0、4.5、9、13.5、18、22.5、27小时，记录玉米种子不发生损伤的吸胀停滞点为18-24小时，玉米种子吸胀的时间段为0-24小时。

优选的，所述S2中，吸胀阶段的菌液浸泡需要震荡，同时，S2步骤在25℃无光照条件下进行。

优选的，所述S3中筛选出的种子未发芽。

优选的，所述S4步骤在共培养基里进行，且S4步骤在25℃无光照条件下进行。

优选的，所述共培养基为在MS培养基中加入琼脂，且共培养基的pH为5.6-5.8。

优选的，所述MS培养基内添加有100mg/L的氯化钠。

优选的，所述S5步骤在温度为32-40℃的光照条件下进行。

本发明的有益效果是：采用本发明能产出高产率的耐干旱玉米，且玉米抗旱效果好。

具体实施方式

下面结合实施例进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。

实施例

一种耐干旱玉米的遗传转化方法，包括如下步骤：

S1. 耐干旱基因或耐干旱诱导基因的选择与培养；所述耐干旱诱导基因选择ZmBTF3b，所述干旱诱导表达基因ZmBTF3b编码蛋白含有169个氨基酸,具有新生多肽复合体保守结构域。