[发明专利]一种耐干旱玉米的遗传转化方法

权利要求书

1.一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：

包括如下步骤：S1. 耐干旱基因或耐干旱诱导基因的选择与培养；S2. 测量成熟玉米种子的生理吸胀曲线，吸胀阶段用含有S1中的耐干旱基因或耐干旱诱导基因的菌液浸泡；S3.筛选出S2中玉米种子不发生损伤的最大吸胀种子；S4.对S3中筛选出的玉米种子用发根农杆菌震荡侵染19.5-20小时至种子发芽；S5.选取发了芽的苗子，清除其上发根农杆菌，并对该苗子用酒精消毒后，转入培养基进行培养，同时在高温光照下培养5-7d，获得耐干旱玉米植株；S6.对S5中获得植株进行分子检测。

2.根据权利要求1所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S1中，所述耐干旱诱导基因选择ZmBTF3b，所述干旱诱导表达基因ZmBTF3b编码蛋白含有169个氨基酸,具有新生多肽复合体保守结构域。

3.根据权利要求1所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S2中，成熟玉米种子生理吸胀曲线的测量方法为取7份等量的成熟玉米种子，每隔4.5小时取一份浸泡到水中，分别浸泡0、4.5、9、13.5、18、22.5、27小时，记录玉米种子不发生损伤的吸胀停滞点为18-24小时，玉米种子吸胀的时间段为0-24小时。

4.根据权利要求1或3所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S2中，吸胀阶段的菌液浸泡需要震荡，同时，S2步骤在25℃无光照条件下进行。

5.根据权利要求1所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S3中筛选出的种子未发芽。

6.根据权利要求1所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S4步骤在共培养基里进行，且S4步骤在25℃无光照条件下进行。

7.根据权利要求6所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述共培养基为在MS培养基中加入琼脂，且共培养基的pH为5.6-5.8。

8.根据权利要求7所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述MS培养基内添加有100mg/L的氯化钠。

9.根据权利要求1所述的一种耐干旱玉米的遗传转化方法，其特征在于：所述S5步骤在温度为32-40℃的光照条件下进行。