[发明专利]基于肿瘤微环境胶原分布进行乳腺癌预后评估的新方法

权利要求书

1.一种基于肿瘤微环境胶原分布进行乳腺癌预后评估的新方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1、根据肿瘤的发展进程将肿瘤微环境中的胶原纤维发展分为三个阶段、八种胶原形态分布特征；

步骤S2、对脱腊后的乳腺癌石蜡包埋组织切片进行多光子扫描成像，获得该切片的若干个二次谐波图像即胶原纤维分布图像；

步骤S3、根据肿瘤微环境中的八种胶原形态分布特征对每张二次谐波图像中的胶原纤维分布进行归类为CDTM1-8，每种胶原特征出现一次记一分，最后获得整个切片八种胶原分布特征相应的分数，记为：X_CDTM1,X_CDTM2,X_CDTM3,X_CDTM4,X_CDTM5,X_CDTM6,X_CDTM7,X_CDTM8；

步骤S4、将每种胶原形态分布特征的分数除以八种胶原分布特征的总分计算出各个胶原特征的百分比；

X_CDTM1％＝X_CDTM1/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM2％＝X_CDTM2/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM3％＝X_CDTM3/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM4％＝X_CDTM4/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM5％＝X_CDTM5/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM6％＝X_CDTM6/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM7％＝X_CDTM7/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

X_CDTM8％＝X_CDTM8/(X_CDTM1+X_CDTM2+X_CDTM3+X_CDTM4+X_CDTM5+X_CDTM6+X_CDTM7+X_CDTM8)

步骤S5、重复步骤S2-S4，计算得到若干个病人的八个胶原特征的百分比，进而采用SPSS统计分析软件进行岭回归分析，获得各个胶原特征的权重和一个常数项，分别为W_CDTM1,W_CDTM2,W_CDTM3,W_CDTM4,W_CDTM5,W_CDTM6,W_CDTM7,W_CDTM8,Constant；

步骤S6、将八种胶原形态分布特征的百分比与对应的八个权重进行加权和，计算出每个病人的最后胶原分布得分，计算公式为：

Score_CDTM＝W_CDTM1*X_CDTM1％+W_CDTM2*X_CDTM2％+W_CDTM3*X_CDTM3％+W_CDTM4*X_CDTM4％+W_CDTM5*X_CDTM5％+W_CDTM6*X_CDTM6％+W_CDTM7*X_CDTM7％+W_CDTM8*X_CDTM8％+Constant；

重复以上步骤，获得若干个病人的胶原分布得分，并结合SPSS统计分析软件获得胶原分布得分与患者五年无病生存期具有统计学意义的受试者工作特征曲线，进而计算获得与患者五年无病生存期相关联的胶原分布得分阈值用于预后评估，即如果患者的胶原分布得分高于阈值越多，则无病生存期低于五年几率越高；相反，如果患者的胶原分布得分低于阈值越多，则无病生存期高于5年几率越高。

2.根据权利要求1所述的基于肿瘤微环境胶原分布进行乳腺癌预后评估的新方法，其特征在于，所述步骤S1的三个阶段、八种胶原形态分布特征的具体定义如下：

第一阶段：

CDTM-1：描述肿瘤发生阶段其周围的胶原分布特征，体现为胶原纤维呈卷曲状包围着小癌巢；

CDTM-2：描述肿瘤生长阶段其周围的胶原分布特征，体现为包围着癌巢的胶原纤维随着癌巢的成长被逐渐拉伸，最后趋向平行于肿瘤边界；

CDTM-3：描述肿瘤开始浸润阶段其周围的胶原分布特征，体现为肿瘤细胞突破包围着的胶原纤维，并改造周边胶原分布，胶原纤维趋向垂直于癌巢边界，同时可以观察到肿瘤细胞沿着胶原纤维迁移；

第二阶段：

CDTM-4：描述肿瘤以膨胀式发展时其与浸润前沿交界处的胶原分布特征，体现为肿瘤边界清晰，胶原纤维在交界处包围着肿瘤，呈现出平行于边界的状态，以阻止肿瘤侵袭，标志肿瘤的入侵方式之一；

CDTM-5：描述肿瘤以穿透式发展时其与浸润前沿交界处的胶原分布特征，体现为无明显的肿瘤边界线，在交界处的胶原纤维具有明显的方向性，呈现出垂直于边界的状态，为肿瘤的侵袭提供方便，标志肿瘤的入侵方式之二；

CDTM-6：描述肿瘤以混乱式发展时其与浸润前沿交界处的胶原分布特征，体现为肿瘤边界不清晰，在交界处的胶原纤维没有方向性，呈现无规律的混乱分布形态，有助于肿瘤的侵袭，标志肿瘤的入侵方式之三；

第三阶段：

CDTM-7：描述肿瘤入侵前沿的胶原分布特征，体现为肿瘤侵袭前沿基质中的胶原纤维分布呈致密型，反映胶原纤维对肿瘤的浸润进程阻碍较多，肿瘤浸润速度将会较慢；

CDTM-8：描述肿瘤入侵前沿的胶原分布特征，体现为肿瘤侵袭前沿基质中的胶原纤维分布呈稀疏型，反映胶原纤维对肿瘤的浸润进程限制作用较小，肿瘤浸润速度将会较快。