[发明专利]提高红曲黄色素Monascin和Ankaflavin纯度的液态发酵方法

权利要求书

1.一种提高红曲黄色素Monascin和Ankaflavin纯度的液态发酵方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1、菌丝体的生长：将红曲菌接种于液态培养基培养至有大量白色菌丝体形成；

步骤2、红曲色素的生物合成：向含有大量白色菌丝体的红曲菌液态培养物中加入灭过菌的pH为7～8，浓度为0.1～0.2mol/L的缓冲液，于25～30℃继续培养3～10d；

步骤3、色素的提取：发酵培养结束后过滤收集菌丝体并清洗后，用乙醇溶液进行提取。

2.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤1中具体为取红曲菌接种于PDB培养基，25～30℃恒温震荡培养38～48h。

3.如权利要求2所述的液态发酵方法，其特征在于，所述振荡培养转速为100～250rpm，振荡培养温度为28℃。

4.如权利要求2所述的液态发酵方法，其特征在于，所述红曲菌的接种物为孢子悬浮液，其具体制备步骤为：将红曲菌接种到产孢培养基中在25℃～30℃下震荡培养4～7d，再于25℃～30℃下继续静置培养3～10d；将培养好的红曲菌菌丝挑出转移至已灭菌的带有玻璃珠的培养瓶中，将菌丝分散，加入无菌水，震摇后过滤，滤液即为孢子悬浮液；所述产孢培养基的配方为：NaNO₃ 3.0g/L，K₂HPO₄ 1.0g/L，KCl 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L,FeSO₄·7H₂O 0.5g/L，蔗糖30.0g/L，酵母膏5.0g/L，pH自然。

5.如权利要求4所述的液态发酵方法，其特征在于，所述红曲菌的孢子悬浮液的接种量为每1mL液体培养基中接种10³～10⁴个红曲菌孢子。

6.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤2中培养温度为28℃；培养时间为5d。

7.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤2中缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液或柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，所述缓冲液的浓度为0.1～0.2mol/L。

8.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤3中清洗采用pH为2的酸水清洗菌丝。

9.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤3中所述提取为超声提取，提取采用pH＝2的70％乙醇。

10.如权利要求1所述的液态发酵方法，其特征在于，所述步骤3中色素的提取采用超声波清洗仪，提取温度为4～60℃。