[发明专利]三项试剂免疫比浊复合测定尿液本周氏蛋白试剂盒

说明书

三项试剂免疫比浊复合测定尿液本周氏蛋白试剂盒，涉及医学检验学领域，解决了目前无法对尿液中本周氏蛋白进行定量检测，同时现有蛋白电泳、免疫固定电泳发等检测方法无法保证高灵敏度和高准确性的问题。本发明包括试剂R1、试剂R2、试剂R3和免疫球蛋白轻链抗原混合冻干品；试剂R1包括表活剂、稳定剂、促进剂、防腐剂、电解质和缓冲剂；试剂R2包括鼠抗人游离κ‑LC轻链单克隆抗体、表活剂、稳定剂、防腐剂、电解质和缓冲剂；试剂R3包括鼠抗人游离λ‑LC轻链单克隆抗体、表活剂、稳定剂、防腐剂、电解质和缓冲剂；免疫球蛋白轻链抗原混合冻干品包括Kappa型抗原与Lambda型抗原。本发明操作简便、灵敏度高、特异性高。

技术领域

本发明涉及医学检验学技术领域，具体涉及一种三项试剂免疫比浊复合测定尿液本周氏蛋白试剂盒。

背景技术

本周氏蛋白(Bence-Jones Protein，BJP)是免疫球蛋白的轻链单体或二聚体，属于不完全抗体球蛋白，分为Kappa型和Lambda型，其分子量分别为2.2KD和4.4KD，每一轻链上的型别只能属于两型别中的某一型别，而不能两者兼而有之，亦即属于Kappa型或是Lambda型，而不能有Kappa-Lambda型者。正常人血清中65％的轻链为Kappa型，35％为Lambda型，Kappa型/Lambda型约为2:1(Kappa/Lambda＝1.9±0.36)。Kappa型和Lambda型的不同主要表现在氨基酸序列和二硫键位置的不同。但是，不同种属的Kappa型或Lambda型之间有较大的相似性，不同种属的Kappa型/Lambda型的比值并不相同，一般Kappa型和Lambda型与重链配对有同样的可能性，只是从某些种属基因表达的研究得知，Kappa基因的重排较先发生于Lambda基因，这可能也是Kappa型出现较多的原因。

人的免疫球蛋白的轻链能自由通过肾小球基底膜的小分子蛋白质，在肾小管被重吸收回到血循环中，所以正常人尿中只有少量本周氏蛋白存在。当代谢失调和多发性骨髓瘤时，血中出现大量本周氏蛋白，并由尿中排出。在免疫球蛋白合成异常激活时，免疫球蛋白合成会造成轻链过剩，多余的轻链运输到肾脏10％被分解，80％重吸收，另外的10％从尿中排出，重链和轻链的合成速度迅速提高，合成一条重链约需2.5min；而合成一条轻链需1min，从而使得轻链的过剩更加严重，尿蛋白排出增加可达到1mg/ml，且都为一个轻链型，从而使Kappa型/Lambda型比率超出正常比值范围。若患者尿中出现单一型轻链异常增多，而另一型往往减少，破坏了Kappa型/Lambda型含量约为2:1的比值，则应高度怀疑多发性骨髓瘤的可能。参考值尿液中Kappa型本周氏蛋白：<15.20mg/L；尿液中Lambda型本周氏蛋白：<5.35mg/L。

轻链阳性或升高见于多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性白血病、巨球蛋白血症、淀粉样变性和恶性肿瘤等。在多发性骨髓瘤患者中，约20％患者只分泌游离轻链，50％的既有单克隆免疫球蛋白，又有单克隆尿轻链，前者预后较差。尿液中本周氏蛋白由于其分子量较小，易通过肾小球迅速从尿中排出，是诊断与监测轻链型多发性骨髓瘤、轻链淀粉样变性的重要标志物。尿中出现的轻链：可分为Kappa型和Lambda型，也有双克隆型。双克隆型是由于同一机体内有两种轻链型生成细胞株同时恶性增殖所至。不同轻链型引起不同类型轻链病：可分为多克隆型，单克隆型和伴随型，所以要加以区分。伴随型轻链是由于单纯型的免疫球蛋白的增加而出现的轻链增多，如骨髓瘤。在尿中的轻链增多时，肾脏受损严重。其他明显的病理损害还有淀粉样变性。因此检测尿液中本周蛋白不单需要监控Kappa型与Lambda型的含量相对比值，还需要分别监控Kappa型和Lambda型游离轻链的含量。

本周氏蛋白又称凝溶蛋白，易受到温度影响，在40-60℃时可发生凝固，温度升至90-100℃时可再溶解。所以在检测过程中需要注意环境条件，需要24h内新鲜的尿液样品，并且不能使用防腐剂。