[发明专利]一种用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽，其特征是：

氨基酸序列为Ala-Leu-Ser-Leu-Val-Lys-Ile-His-Gly-Arg。

2.一种如权利要求1所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽的制备方法，其特征是：

具体步骤如下：

(1)发酵乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）LY3-1，离心、过膜，获得无细胞上清液，所述乳酸乳球菌LY3-1的保藏号为GDMCC No.60751；

(2)乙酸乙酯萃取无细胞上清液，获得肽LQLY3-1粗品；

(3)超滤结合凝胶层析法纯化肽LQLY3-1粗品，获得Mr5kDa的肽LQLY3-1精制品；

(4)采用高效液相色谱法，提纯肽LQLY3-1精制品，获得肽LQLY3-1纯品。

3.根据权利要求2所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽的制备方法，其特征是：发酵乳酸乳球菌LY3-1时，于MRS液体培养基，37℃发酵，时间为12h。

4.根据权利要求2所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽的制备方法，其特征是：过膜时，用0.45μm滤膜过滤。

5.根据权利要求2所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽的制备方法，其特征是：所述的乙酸乙酯萃取条件包括：V_{无细胞上清液}：V_乙酸乙酯=1:1，时间为10min-15min。

6.根据权利要求2所述的用于哈维氏弧菌群体的感应抑制肽的制备方法，其特征是：

凝胶层析纯化条件为：Sephadex G-25凝胶柱，平衡液和洗脱液为20mmol/L、pH6.0磷酸盐缓冲液，流速为0.5 mL/min，上样量为2.0mL，280nm处测定其吸光度值。

7.根据权利要求2所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽的制备方法，其特征是：

高效液相色谱提纯条件为：C18反相柱，流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液，流动相B为0.1%三氟乙酸甲醇溶液，梯度洗脱流动相B，0%平衡4min，0%-100%洗脱21min，100%-100%平衡6min，100%-0%洗脱3min，0%平衡6min，流速为0.8mL/min；进样量为20μL，紫外检测波长280nm。

8.一种如权利要求1所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽在制备抑制哈维氏弧菌抗菌药物中的应用。

9.一种如权利要求1所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽在制备抑制哈维氏弧菌抗菌药物的中的应用，其特征是：该抑制肽对哈维氏弧菌的最小抑菌浓度为16mg/mL。

10.一种如权利要求1所述的用于哈维氏弧菌群体感应的抑制肽在制备抑制哈维氏弧菌抗菌药物的中的应用，其特征是：在亚最小抑菌浓度0.08 mg/mL-8 mg/mL范围内可以抑制哈维氏弧菌的群体感应系统。