[发明专利]一种医用敷料的制备方法

说明书

本申请提供一种医用敷料的制备方法，包括含分泌素PLGA缓释微球的制备、水凝胶的制备、电纺丝膜的制备和干细胞分泌素医用敷料的制备。本申请采用亚全能干细胞分泌素、PLGA缓释微球与透明质酸水凝胶相结合，并以电纺丝膜为载体制备医用敷料，亚全能干细胞分泌素富含多种活性因子，对创面具有较好的修复作用；实验表明，采用本申请制备的医用敷料，对急性和慢性创伤均有良好的缓解愈合作用，本申请制备的医用敷料能良好的粘附在伤口上，PLGA缓释微球中的亚全能干细胞分泌素缓慢释放，大大提高了分泌素的利用率，以及耐久性，并且PLGA缓释微球容纳亚全能干细胞分泌素的量相比较多，降低了换药次数，避免了换药过程中的二次创伤，有利于创面修复。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种医用敷料的制备方法。

背景技术

创伤、手术和慢性疾病的创伤愈合每年都影响着全世界数以百万计的人。促进意外和故意伤害所造成损伤的愈合以及恢复组织结构和功能在目前临床应用上仍然是一个困难挑战。不良皮肤愈合的病因是多种多样的，但一般可分为溃疡性皮肤缺损(慢性伤口)和瘢痕过度形成(增生性瘢痕或瘢痕疙瘩)。慢性创伤多通过时序性的修复过程来重塑组织结构和功能完整性，但是，血管功能不全、代谢性疾病和局部压力效应通常会阻碍这个过程。糖尿病是最常见的代谢疾病，其会导致慢性伤口再生受阻。据估计，到2030年，全球2型糖尿病的患病率会从6.4％上升到8％。据报道，约1至4％的糖尿病患者每年会发生脚部溃疡，10至15％在他们的一生中将会患脚部溃疡。目前的治疗包括力学卸载、手术清创和药物治疗，但治疗效果大多不能令人满意，从而导致最终导致坏疽和肢体截肢。糖尿病足溃疡患者的5年死亡率甚至高于前列腺癌和乳腺癌。事实上，糖尿病足溃疡相关的截肢患者的5年死亡率约为50％。此外，对其他慢性伤口的治疗，包括静脉腿部溃疡、动脉溃疡和压疮也不能尽如人意。据报道，约50％的慢性伤口不能对目前的治疗方法有反应。尽管有大量的临床需求，过去的15年内只有一种生物药物(重组人PDGF-BB，ReGrimeX有限公司)和两个生物/装置(Apl igraf和Dermagraft)已被美国食品和药物管理局批准用于糖尿病足的治疗。截至目前，基于人类伤口样本和动物模型的研究已经为损伤恢复研究提供了深入的病理学基础。一些新的结合生物活性成分的伤口敷料已经被开发出来用以促进或刺激局部伤口愈合。然而，效果不太理想。

发明内容

本申请为解决上述技术问题而提供。

本申请所采取的技术方案是：一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)含分泌素PLGA缓释微球的制备

S1、将PLGA溶解在二氯甲烷中，制成浓度为10％(w/v)的PLGA二氯甲烷溶液；

S2、将干细胞分泌素粉末溶解在去离子水中，制成干细胞分泌素溶液；

S3、涡旋震荡条件下，将干细胞分泌素溶液滴加到PLGA二氯甲烷溶液中混合，然后，冰浴条件下用超声乳化10min，制成W/O初乳；

S4、涡旋震荡条件下，将W/O初乳滴加到PVA水溶液中，然后，冰浴条件下间歇性的用超声处理，制成W/O/W复乳；超声条件为：10-38％振幅(418J)，每4s停10s，超声时间为2min；

S5、将W/O/W复乳滴加到PVA水溶液中稳定微球颗粒，35℃下搅拌挥发法去除二氯甲烷，离心收集微球，去离子水重悬微球，冷冻干燥，得干细胞分泌素微球；

(2)水凝胶的制备

S6、向浓度为1:200(w/v)的透明质酸溶液中滴加等体积的二甲基甲酰胺，同时加入甲基丙烯酸酐，搅拌反应完全后加入氯化钠,使得溶液中氯化钠终浓度为0.5M，然后透析纯化，真空冷冻干燥制得经甲基丙烯酸酐修饰的透明质酸粉末；