[发明专利]一种医用敷料的制备方法

权利要求书

1.一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)含分泌素PLGA缓释微球的制备

S1、将PLGA溶解在二氯甲烷中，制成浓度为10％(w/v)的PLGA二氯甲烷溶液；

S2、将干细胞分泌素粉末溶解在去离子水中，制成干细胞分泌素溶液；

S3、涡旋震荡条件下，将干细胞分泌素溶液滴加到PLGA二氯甲烷溶液中混合，然后，冰浴条件下用超声乳化10min，制成W/O初乳；

S4、涡旋震荡条件下，将W/O初乳滴加到PVA水溶液中，然后，冰浴条件下间歇性的用超声处理，制成W/O/W复乳；超声条件为：10-38％振幅(418J)，每4s停10s，超声时间为2min；

S5、将W/O/W复乳滴加到PVA水溶液中稳定微球颗粒，35℃下搅拌挥发法去除二氯甲烷，离心收集微球，去离子水重悬微球，冷冻干燥，得干细胞分泌素微球；

(2)水凝胶的制备

S6、向浓度为1:200(w/v)的透明质酸溶液中滴加等体积的二甲基甲酰胺，同时加入甲基丙烯酸酐，搅拌反应完全后加入氯化钠,使得溶液中氯化钠终浓度为0.5M，然后透析纯化，真空冷冻干燥制得经甲基丙烯酸酐修饰的透明质酸粉末；

S7、将步骤S1中经甲基丙烯酸酐修饰的透明质酸粉末与制得的干细胞分泌素微球混合，使用磷酸盐缓冲液溶解，然后再加入I2959紫外光引发剂，于模具内于365nm-514nm紫外线下持续照射5-20min制得透明质酸水凝胶；

(3)电纺丝膜的制备

S8、将聚己内酯溶解在体积比为2:1的氯仿和N,N-二甲基酰胺混合溶剂中，制得浓度为0.02％-10％的电纺溶液，静电纺丝制得电纺丝膜；

(4)干细胞分泌素医用敷料的制备

S9、将步骤S2中制得的透明质酸水凝胶涂抹在步骤S8制得的电纺丝膜上，即制得干细胞分泌素医用敷料。

2.如权利要求1所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，干细胞分泌素溶液的浓度为2％-3％(w/v)。

3.如权利要求2所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中，所述PVA水溶液的浓度为2.5％-3.5％(w/v)。

4.如权利要求3所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中，所述PVA水溶液的浓度为0.2％-0.4％(w/v)。

5.如权利要求4所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，在分泌素PLGA缓释微球的制备过程中，PLGA二氯甲烷溶液：干细胞分泌素溶液：步骤S4中PVA水溶液：步骤S5中PVA水溶液的体积比为5:1:20:500。

6.如权利要求5所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S6中，甲基丙烯酸酐与透明质酸的摩尔比为1.5:1-2.5:1。

7.如权利要求6所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S6中，透析纯化过程为利用透析膜，2-6℃条件下透析6-8天。

8.如权利要求7所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S7中，经甲基丙烯酸酐修饰的透明质酸粉末与干细胞分泌素微球初步混合溶解后，所述经甲基丙烯酸酐修饰的透明质酸的浓度为1-3％(w/v)，所述干细胞分泌素微球的浓度为1ng/μL-1mg/μL(w/v)。

9.如权利要求8所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所步骤S8中，静电纺丝工艺参数为电压5KV-20KV，注射器针头孔径为0.5-1.5mm，喷射距离为8cm-20cm，电纺丝膜制备完成后静置24h。

10.如权利要求9所述的一种医用敷料的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的干细胞分泌素来源于人亚全能干细胞、骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、皮肤间充质干细胞或脐带间充质干细胞。