[发明专利]大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法

说明书

本发明公开了一种大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，属于生物技术领域，包括的步骤有：将消毒灭菌处理后的带节茎段外植体接种于培养基中，进行诱导腋芽萌发、基茎丛生芽发生和增殖，克服烧尖坏死，复壮生根，炼苗移栽。本发明彻底解决了玄参科尤其是胡麻草属植物体外快繁中常见的烧尖坏死现象，且成本低、周期短、种苗质量和成活率高。此外，对大花胡麻草无菌种苗生产工艺进行了优化调整，在改善烧尖坏死的同时，同步进行腋芽萌发生长、基茎丛生芽诱导和生长，简化了组培过程，3个培养过程同时在一个培养基中进行，大大提高了繁殖效率。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法。

背景技术

大花胡麻草Centranthera grandiflora Benth.为玄参科(Scrophulariaceae)胡麻草属(Centranhera)植物，直立粗壮草本，高50-80cm；主要产于云南、贵州、广西等省，生于海拔800m之山坡、路旁及空旷处，越南、缅甸、印度也有分布。

《中华本草》记载：大花胡麻草以根入药，鲜用或晒干，俗称红根野蚕豆、小红药、化血丹、灵芝草、金猫头；味甘、淡；性温；有活血调经，散瘀止痛功效；用于闭经、痛经、崩漏、跌打损伤、风湿骨痛；外用治疗出血；主要被用于防治多种心脑血管疾病，疗效显著，为当地苗族地区名贵地方药。

目前，对大花胡麻草的认识还停留在云南红河州当地苗族的民间用药和习惯用药上，其药源仍然来自于野生资源的采挖。发明人于2016-2018年连续3年在云南文山、红河等产地对大花胡麻草进行生物学及物候学观察，发现其花期在每年的7-9月，开花期在野外较易辩认，使当地药农在其花期无序进行毁灭性采挖，使其有性繁殖中断或成熟种子数量大大减少，这是导致大花胡麻草走向濒危边缘的根本原因。少数药农为扩大栽培规模，专门设置育种圃来生产大花胡麻草种子，但萌发率极低仅20-30％左右，且在幼苗期具极高的死亡率；而有性生殖会导致遗传性化学成份的变异，不利于大花胡麻草的标准化、规模化种植。

由于大花胡麻草潜在的药用价值和极低的有性生殖效率，促使很多学者对其进行了体外快繁研究，但在烧尖坏死、繁殖系数、移栽成活率及较高成本方面仍存在一些问题，使组培苗的整体应用仍处于较低水平。因此，需要寻求一种新的成本低、时间短、瓶苗质量和成活率高，无烧尖坏死且能将优良性状固定下来的无性繁殖方法来扩大大花胡麻草种苗的繁殖量，进行高品质种苗的工厂化生产，以满足种植需求。

发明内容

本发明的目的在于解决上述现有繁殖技术存在的缺陷，提供一种能够提高大花胡麻草快速繁殖效率的方法，该方法为保护其野生资源和发展人工种植奠定技术基础，同时可将优良性状固定下来，提供基因型背景一致的优质种苗以满足人工种植的需求。

为了解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：

大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，包括的步骤有：将消毒灭菌处理后的带节茎段外植体接种于培养基中，进行诱导腋芽萌发、基茎丛生芽发生和增殖，克服烧尖坏死，复壮生根，炼苗移栽。

进一步地，所述的大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，包括以下步骤：

(1)外植体的获取：选择生长势好、无病虫害、无畸形的健壮植株，取其茎尖下茎段；

(2)将1步骤的带节茎段进行消毒处理；

(3)诱导腋芽萌发、基茎丛生芽发生和增殖：将经过2步骤消毒灭菌好的外植体以插入的方式接入下列培养基A中，所述A培养基，包括以下原料：

MS基本培养液

6-苄胺基嘌呤(6-BA)

萘乙酸(NAA)

活性炭(AC)

蔗糖