[发明专利]一种鼠李糖脂发酵方法在审
申请号: | 201910859981.8 | 申请日: | 2019-09-11 |
公开(公告)号: | CN112481335A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
发明(设计)人: | 姜西娟;王竞辉;杨付伟;张稳;石森;单雨瑶;张雅萍;刘斌;孔令晓 | 申请(专利权)人: | 万华化学集团股份有限公司 |
主分类号: | C12P19/44 | 分类号: | C12P19/44;C12N1/20;C12R1/385;C12R1/40 |
代理公司: | 北京卓恒知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11394 | 代理人: | 唐曙晖 |
地址: | 264006 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖脂 发酵 方法 | ||
本发明公开了一种鼠李糖脂发酵方法,其包括如下步骤:(A)选用铜绿或恶臭假单胞菌,进行菌种活化;(B)从活化菌种中挑取单菌落接种至种子培养基中培养;(C)将种子液按1‑10%的接种量接种至发酵培养基中培养,其中,根据产物所需的单双鼠李糖脂的比例,发酵培养基选择使用不同的碳源,且发酵培养基包括微量元素,所述微量元素至少包含H3BO4、CuSO4和Na2MoO4。该方法鼠李糖脂对底物的转化率高达90%以上。另外,可通过改变碳源种类和复合碳源配比调控产物中单双鼠李糖脂比例。同时再通过向发酵培养基中添加少量特定组成的微量元素溶液,可有效提高假单胞菌产鼠李糖脂的速率,明显缩短发酵时间25%,在降低发酵成本的也可大幅度减小发酵罐染菌的概率。
技术领域
本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种鼠李糖脂发酵方法。
背景技术
鼠李糖脂由于其具有增溶、乳化、润湿、发泡等性能,而且具有低毒、对环境友好等特点,因而在石油开采、医药、食品、日化和环保等领域具有很大的应用潜力,成为近年来研究较为广泛的生物表面活性剂,近年来,鼠李糖脂在抗菌、抗病毒和抗肿瘤等方面也表现出一定的生物活性,进一步促进了它的研究热度。鼠李糖脂是一种微生物的次级代谢产物,有两种类型,分别为含有一个鼠李糖环的单鼠李糖脂和含有两个鼠李糖环的双鼠李糖脂,鼠李糖脂结构中同时含有亲水基团和疏水基团,由于疏水基团饱和或不饱和脂肪酸中碳原子数的不同,鼠李糖脂含有多种结构,常见的碳原子数目一般为8、10、12或14,梁生康等在铜绿假单胞菌O-2-2的发酵产物中共检出21种鼠李糖脂的同系物,其中最常见的是RhaC10C10、Rha2C10C10、RhaC10、Rha2C104四种结构。另外,由于双鼠李糖脂中亲水基团的亲水性更强,导致具有更低的界面张力,在促进石油采收和油田化学用品中更有优势。因此,通过调节发酵液中的单双鼠李糖脂的比例,可以根据发酵液的性能更具有针对性将其应用于不同的方向和领域。
鼠李糖脂发酵是好氧发酵,发酵过程中的搅拌和通气使得发酵液以泡沫形式溢出,不仅会损失培养基中的营养和菌体,而且极易导致后续发酵染菌。目前,限制鼠李糖脂在工业上广泛应用的主要因素是其过高的生产成本以及发酵过程中泡沫难以控制,目前控制泡沫主要采用化学消泡法。因此,如何降低鼠李糖脂的生产成本成为目前研究的热点,为了降低其生产成本,很多研究通过优化发酵过程,提高发酵产率,缩短发酵时间,从而降低发酵成本。
发明内容
本发明目的之一是优选一种发酵工艺,提高碳源转化率,降低鼠李糖脂工业化成本。
本发明目的之二在于可根据需要通过改变原料种类和配比调节产物中单鼠李糖脂和双鼠李糖脂比例,而不降低产量。
为实现上述技术目的,本发明采用如下技术方案,
一种鼠李糖脂发酵方法,包括如下步骤:
(A)选用铜绿或恶臭假单胞菌,进行菌种活化;
(B)从活化菌种中挑取单菌落接种至种子培养基中培养,得到种子液;
(C)将种子液按1-10vol%的接种量接种至发酵培养基中进行培养,其中根据产物所需的单双鼠李糖脂的比例,发酵培养基选择使用不同的碳源,且发酵培养基与微量元素混合使用,所述微量元素至少包含H3BO4、CuSO4和Na2MoO4。
本发明中,种子培养基可以采用现有的用于鼠李糖脂发酵的种子培养基,例如LB种子培养基:蛋白胨10.0g/L;酵母粉5.0g/L;NaCl 10.0g/L。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于万华化学集团股份有限公司,未经万华化学集团股份有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910859981.8/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:天线结构及其运作方法
- 下一篇:一种具有防漏光功能的增光片