[发明专利]一种HYML-122血药浓度定量分析方法

说明书

本发明公开了一种HYML‑122血药浓度定量分析方法，涉及药物分析技术领域，包括以下步骤：用HYML‑122标准品和空白生物基质配制标准曲线样品，采用内标物工作液沉淀后，采用UPLC‑MS/MS法检测，进样并绘制标准曲线获得回归方程，取待测血浆按同样方法处理，采用回归方程计算HYML‑122的血药浓度；其中，高效液相色谱条件为：色谱柱为ACE C18‑AR色谱柱；流动相A为0.01‑0.2％甲酸水溶液，流动相B为甲醇；流速为0.45‑0.55mL/min；柱温为35‑45℃；进行梯度洗脱并分析。本发明可适用于人血样，以及大鼠、小鼠、犬、猴等动物的血样分析，方法简便快捷，适用性广，样品使用量少，分析高效，重现性高、灵敏度高，准确度高。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种HYML-122血药浓度定量分析方法。

背景技术

CHMFL-FLT3-122(也叫HYML-122)为合肥合源药业有限公司和中国科学院合肥物质科学研究院联合研发的1.1类抗肿瘤药物。FLT3-ITD是其中一种常见基因突变类型约占30％，与疾病发生和不良预后性密切相关，是治疗AML(急性髓细胞性白血病)的热门靶点，HYML-122是一种新的有效抑制FLT3-ITD阳性的AML肿瘤细胞药物。此1.1类新药已获得临床批件，并开展临床研究。

为了保证用药的安全性，及时高效的进行相关研究，考察药物在人和动物体中的血药浓度，完善药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄情况是非常必要的，而检测方法的准确、快速，可以进一步增加临床试验的准确性，并缩短检测时间，并且由于HYML-122结构创新性，目前国内外并未有针对HYML-122的检测分析方法，因此需要提供准确高效、简单快速的检测方法。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种HYML-122血药浓度定量分析方法，该方法稳定可靠、灵敏准确，检测周期短，且样品前处理简单，可用于人和动物的相关试验研究。

本发明提出的一种HYML-122血药浓度定量分析方法，包括以下步骤：用HYML-122标准品和空白生物基质配制标准曲线样品，采用内标物工作液沉淀后，采用UPLC-MS/MS法检测，进样并绘制标准曲线获得回归方程，取待测血浆采用内标物工作液沉淀后按同样方法处理，采用回归方程计算HYML-122的血药浓度；

其中，UPLC-MS/MS法的高效液相色谱条件为：色谱柱为ACE Excel 1.7μmC18-AR色谱柱；流动相A为pH＝2.0-6.5的体积分数为0.01-0.2％甲酸水溶液，流动相B为甲醇；流速为0.45-0.55mL/min；柱温为35-45℃；进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序为：0-1.3min内，维持流动相A和流动相B的体积比为30：70；1.3-1.5min内，流动相A和流动相B体积比从30：70渐变为100％流动相B；1.5-2min内，维持100％流动相B；2.01-2.5min内，流动相A和流动相B维持体积比为30：70；

UPLC-MS/MS法的质谱条件为：离子源为ESI离子源；检测方式为正离子检测；扫描方式为多反应监测MRM；接口电压为0.5-4kV；接口温度为250-375℃；DL温度为200-300℃；加热块温度为400℃；雾化气流量为3L/min；加热气流量为10L/min；干燥气流量为10L/min。

优选地，高效液相色谱条件中，色谱柱的规格为50mm×2.0mm，粒径为1.7μm。

优选地，高效液相色谱条件中，采用氨水调节流动相A的pH。

优选地，高效液相色谱条件中，进样量为5-20μL。

优选地，所述空白生物基质为健康的人或动物的全血经EDTA-K2抗凝、分离后的血浆，于-80℃冰箱保存，临用前在室温条件下自然解冻即得。其中，动物可为大鼠、小鼠、犬、猴。

优选地，所述内标物工作液中的内标物为地塞米松。