[发明专利]一种末端脱氧核糖核苷转移酶变体及其应用有效
| 申请号： | 201910834783.6 | 申请日： | 2019-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN110331136B | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 江会锋;彭凯;逯晓云;阮江星;王千;卢丽娜 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12P19/34 |
| 代理公司： | 11535 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 刘元霞 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 合成核酸分子 脱氧核糖核苷 转移酶 变体 野生型氨基酸序列 酶促反应 耦合效率 核苷酸 模板链 可控 位点 修饰 突变 应用 引入 | ||
【权利要求书】：
1.一种末端脱氧核糖核苷转移酶(TDT)变体，其特征在于，所述变体的氨基酸序列为仅在对应于SEQ ID NO:1第396位置的天冬氨酸被谷氨酸取代，或仅在对应于SEQ ID NO:1第403位置的赖氨酸被甲硫氨酸取代。
2.如权利要求1所述的变体在提高3’-端修饰的核苷酸聚合效率中的应用，或者在合成核酸分子中的应用。
3.一种在没有模板链的情况下合成核酸分子的方法，所述方法包括在权利要求1所述变体的存在下，使引物链与至少一种核苷酸接触，所述核苷酸为3’-OH端经修饰的核苷酸。
4.根据权利要求3所述的方法，所述变体与3’-OH端经修饰的核苷酸进行耦合。
5.根据权利要求3或4所述的方法，所述3’ -OH端经修饰的核苷酸是所述核苷酸的3’-OH端加入阻断基团进行修饰。
6.根据权利要求5所述的方法，所述阻断基团选自磷酸基团、氨基、叠氮基团、 2-硝基苯基中的至少一种。
7.根据权利要求5所述的方法，所述3’ -OH端经修饰的核苷酸的5’端含有2个或3个磷酸基团。
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