[发明专利]一种稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒在审
申请号: | 201910817182.4 | 申请日: | 2019-08-30 |
公开(公告)号: | CN110514826A | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | 李静;史建国;包兴艳;李志明;胡晓飞;甘宜梧;董雯 | 申请(专利权)人: | 山东博科生物产业有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/531 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 250299 山东省济南市章丘区明水*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表面活性剂 防腐剂组成 检测试剂 胶乳颗粒 抗原包被 瓜氨酸 缓冲液 抗环瓜氨酸肽抗体 复合 生物技术领域 无机盐离子 羧基胶乳 灵敏度 粒径 联用 微球 灵敏 | ||
1.一种稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,包括试剂R1和试剂R2,其中:
所述试剂R1的成分和含量如下:
所述试剂R2的成分和含量如下:
所述环瓜氨酸抗原包被胶乳颗粒的制备方法如下:
步骤1:将72nm羧基胶乳颗粒、126nm羧基胶乳颗粒、280nm羧基胶乳颗粒按体积比为3:2:1的比例进行混匀;
步骤2:向步骤1得到的溶液中加入AMPD缓冲液,振荡混匀,然后20000rpm离心65min,弃上清;之后再次加入AMPD缓冲液,进行超声重悬;
步骤3:向步骤2得到的溶液中加入EDC溶液,在20℃温度下振荡反应45分钟;
步骤4:向步骤3得到的溶液中加入环瓜氨酸抗原,混匀,在30℃温度下振荡反应5小时;
步骤5:向步骤4得到的溶液中加入封闭剂,在25℃温度下封闭24小时。
步骤6:对步骤5得到的溶液进行20000rpm离心60min,弃上清,然后加入缓冲液,进行超声重悬5分钟,再次20000rpm离心60min,去除上清,所得沉淀即为环瓜氨酸抗原包被胶乳颗粒。
2.根据权利要求1所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述缓冲液为25℃,pH为7.8-8.2的CAPSO-ADA复合缓冲液。
3.根据权利要求1所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述表面活性剂的成分和含量如下:
月桂基羧甲基钠型味唑啉乙酸盐 15g/L
芥酸酰胺丙基甜菜碱 10g/L
聚乙二醇双硬脂酸酯 20g/L。
4.根据权利要求1所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述环瓜氨酸抗原包被胶乳颗粒的制备方法中,所述步骤2中的AMPD缓冲液的浓度为3mM,PH值为5~6;所述步骤6中的缓冲液为TABS缓冲液。
5.根据权利要求1所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述防腐剂为二羟甲基脲。
6.根据权利要求1至5中任一所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述无机盐离子为氯化钾、氯化钠、氯化镁中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的稳定、灵敏的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒,其特征在于,所述试剂R1与试剂R2的体积比为3:1。
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