[发明专利]一种HAO兔多克隆抗体的制备方法及应用在审
| 申请号： | 201910808548.1 | 申请日： | 2019-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN110590954A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 赵辰;邱志刚;王景峰;谌志强;薛斌;王尚;李辰宇 | 申请（专利权）人： | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 |
| 主分类号： | C07K16/40 | 分类号： | C07K16/40;C07K16/06;G01N33/573 |
| 代理公司： | 11465 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 赵徐平 |
| 地址： | 300050*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多克隆抗体 重组蛋白 抗体 制备 抗原亲和纯化 兔多克隆抗体 动物血清 原核表达 悬浮液 蛋白 注射 检测 | ||
1.一种HAO兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
1)制备HAO重组蛋白：通过原核表达得到HAO重组蛋白；
2)制备HAO抗体血清：将步骤1)所得HAO重组蛋白制备成悬浮液，并对动物进行注射，得到HAO抗体血清；
3)HAO多克隆抗体纯化：采用抗原亲和纯化的方法对HAO抗体血清进行纯化，得到多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的一种HAO多克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤2)中，将HAO重组蛋白制成悬浮液进行免疫的具体过程为：
首次免疫时，将HAO重组蛋白0.3mg与弗氏完全佐剂混合，并对动物进行注射；第二、三、四次免疫将HAO重组蛋白0.15mg与不完全弗氏佐剂混合，形成油包水的乳浊液，震荡混匀后，吸入针管进行注射。
3.根据权利要求2所述的一种HAO多克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤2)中，从动物血清中制备HAO抗体的具体过程为：
第1天常采用完全弗氏佐剂免疫动物，在第12、26、40天采用不完全弗氏佐剂进行第二、三、四次免疫，第52天处死动物采血得到抗HAO血清抗体。
4.根据权利要求1所述的一种HAO多克隆抗体在制备ELISA法检测Hydroxylamineoxidoreductase蛋白的试剂中的应用。
5.根据权利要求1所述的一种HAO多克隆抗体在制备检测HAO试剂盒中的应用。
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