[发明专利]一种鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法有效
申请号: | 201910807553.0 | 申请日: | 2019-08-29 |
公开(公告)号: | CN110590946B | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 谢秉超;黄淑芬;严悌昆;张毓金 | 申请(专利权)人: | 广东渔跃生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C07K16/02 |
代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 张帅 |
地址: | 511500 广东省清远市清城区石角镇广州(*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鸭呼肠孤 病毒 卵黄 抗体 制备 方法 | ||
1.一种鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)利用鸭呼肠孤病毒灭活疫苗免疫育龄母鸡,获得高免鸡蛋;
(2)收集高免鸡蛋蛋黄,去除卵黄膜和系带后利用胶体磨进行破碎,得蛋黄液;
(3)将步骤(2)得到的蛋黄液与纯化水以1:1~3的体积比混合,搅拌均匀后加入终浓度重量体积比为1~3%的柠檬酸及1~4%的聚阴离子纤维素,充分搅拌后,1~5℃放置3~6h,1~5℃离心,收集上清液;
(4)将步骤(3)收集的上清液过滤除菌后即得卵黄抗体液。
2.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,特征在于,所述步骤(3)中蛋黄液与纯化水以1:2的体积比混合。
3.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,特征在于:所述步骤(3)中搅拌均匀后加入终浓度重量体积比为1.5%的柠檬酸及2%的聚阴离子纤维素。
4.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,特征在于:所述步骤(3)中低温放置温度为3℃,放置时间为5小时。
5.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,特征在于:所述步骤(3)低温离心条件为3℃11000r/min离心25分钟。
6.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,特征在于:所述步骤(1)中的鸭呼肠孤病毒灭活疫苗,其为用传代细胞系LMH细胞生产的鸭呼肠孤病毒灭活疫苗。
7.如权利要求1所述的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)蛋黄液的获得为:将高免鸡蛋用75%酒精进行表面消毒,分离出蛋黄,过60目尼龙筛去除卵黄膜和系带,然后置于胶体磨中研磨5min,即得蛋黄液。
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