[发明专利]一种黄曲霉毒素M族专用净化柱及应用

权利要求书

1.一种黄曲霉毒素M族专用净化柱在检测乳及乳制品中黄曲霉毒素M族含量的应用，其特征在于，

所述黄曲霉毒素M族为AFM₁、AFM₂，

所述专用净化柱，包括柱管，所述柱管内从柱管出液端至柱管进液端依次设有下筛板、填料和上筛板，所述填料为石墨化碳和纳米四氧化三铁的混合物；柱管内填料的填充量为200mg；

所述石墨化碳的粒径为120～400目，所述纳米四氧化三铁的粒径为10～30nm；

所述纳米四氧化三铁与石墨化碳的重量比为1：2～4；

检测的方法包括如下步骤：

(1)向乳及乳制品中加入提取溶剂，振荡、超声处理后，加入NaCl，离心取上清液；再将上清液过黄曲霉毒素M族专用净化柱，利用淋洗溶剂淋洗、洗脱溶剂洗脱，接洗脱液；

(2)洗脱液用氮气吹干，加入流动相复溶，振荡、超声处理后，过0.22μm滤膜，采用高效液相色谱法进行检测；

所述提取溶剂为乙腈与水的体积比为10：3～5的乙腈水溶液，提取溶剂的温度为40～60℃；

所述淋洗溶剂为乙腈、10％乙腈水溶液、50％乙腈水溶液或50％甲醇水溶液；

所述洗脱溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮或乙酸乙酯；

所述高效液相色谱法是使用带有荧光检测器的高效液相色谱仪进行检测，条件如下：

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18，250×4.6mm，5μm；柱温：40℃；

流动相：A相为1％乙酸水溶液，B相为乙腈-甲醇，50+50；等度洗脱，A:B＝7:3；

流速：1.0mL/min；进样量：50μL；

检测波长：激发波长360nm，发射波长430nm。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述淋洗溶剂为50％乙腈水溶液。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述洗脱溶剂为二氯甲烷。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述将上清液过黄曲霉毒素M族专用净化柱具体为：准确吸取6mL上清液，过黄曲霉毒素M族专用净化柱。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将上清液过黄曲霉毒素M族专用净化柱后，用2mL 50％乙腈水溶液淋洗，用6mL二氯甲烷洗脱。