[发明专利]一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽的制备方法

说明书

本发明提出了一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽的制备方法，以东海乌参胶原蛋白为原料，通过酶解、浓缩，得到高浓度胶原蛋白水解产物，加入一定量的牛磺酸，在适宜条件下进行类蛋白反应获得牛磺酸修饰的新型抗氧化肽。本发明中新型多功能肽的制备方法，其反应效率高，合成耗时短，产物易纯化，降低了生产成本，预处理过的生物原料活性不受破坏，且产物活性能得到提升。

技术领域

本发明涉及抗氧化肽技术领域，具体涉及一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽的制备方法。

背景技术

目前，抗氧化肽主要通过酶解蛋白而获得。但是，利用酶水解的方式从蛋白质中得到抗氧化活性肽存在着一个明显的局限性，即抗氧化肽的一级结构肯定来源于原料蛋白质一级结构中的某一部分，所以抗氧化肽的活性必定取决于原料蛋白质的一级结构。这样，仅仅采用酶水解蛋白质的方式，无法直接得到不同于原料蛋白质一级结构的肽片段，即无法通过酶水解的方式从原料蛋白质中得到更高活性的抗氧化肽。所以，对抗氧化肽进行分子修饰，在己有的抗氧化肽分子上再连接或把个别氨基酸替换成其他特定结构的分子，形成的新化合物具有不同于原多肽的特殊结构，从而有可能改善其抗氧化的活性。

牛磺酸是一种含硫的氨基酸，广泛存在于海洋生物中，但其不参与蛋白质合成，在体内以游离状态存在。牛磺酸是调节机体正常生理活动的活性物质，具有广泛的生理功能，对动物大脑、心脏、肝脏、性腺等器官的发育都有十分重要的作用。现代医学实验证明，牛磺酸具有促进婴幼儿脑组织和智力发育、提高神经传导和视觉机能、防止心血管病、改善内分泌状态，增强人体免疫、维持机体渗透压平衡、改善记忆、增强细胞膜抗氧化能力，延缓衰老、保护心肌细胞等功效。牛磺酸在临床上已被广泛应用于心血管疾病、糖尿病、消化道疾病、神经系统疾病、眼部疾病等一系列疾病的治疗。在食品领域，牛磺酸已作为一种优良的大众化食品营养强化剂被广泛地添加到乳制品、饮料、豆制品、饲料等食品中。在牛奶中加入适量的牛磺酸，其营养价值可接近人奶。在饲料中添加牛磺酸能够明显提高和改善畜禽的生长性能、繁殖能力和免疫力。利用牛磺酸对现有抗氧化肽进行修饰，可获得体内无法合成的新型多肽，是非常有前景的新型活性肽的开发策略。

发明内容

本发明提供一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽及其制备方法，其目的在于，提供一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽的制备方法，其反应效率高，合成耗时短，产物易纯化，降低了生产成本，预处理过的生物原料活性不受破坏，且产物活性能得到提升。

本发明提供一种牛磺酸修饰的新型抗氧化肽，包括：

A.天然多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示；

B.在A限定的多肽上，为替代原氨基酸或者在多肽N端或C端增联一个氨基酸，所述氨基酸为牛磺酸。

作为本发明进一步的改进，所述天然多肽为东海乌参胶原蛋白水解蛋白产物。

本发明进一步保护一种上述牛磺酸修饰的新型抗氧化肽的制备方法，以东海乌参胶原蛋白为原料，通过酶解、浓缩，得到高浓度胶原蛋白水解产物，加入一定量的牛磺酸，在适宜条件下进行类蛋白反应获得牛磺酸修饰的新型抗氧化肽。

作为本发明进一步的改进，所述东海乌参胶原蛋白的制备方法如下：选用东海乌参作为原料，切碎，经过酸、碱和柠檬酸的浸泡，去除重金属和杂蛋白，得到粗胶原蛋白，向粗胶原蛋白溶液中加入氯化钠，离心，弃除上清液，固体经透析、冷冻干燥得到东海乌参胶原蛋白。

作为本发明进一步的改进，所述东海乌参胶原蛋白的酶解方法如下：向东海乌参胶原蛋白溶液中加入NaOH溶液，调节pH至8.5，加入碱性蛋白酶，适宜温度下酶解2-4h，灭活，离心，收集上清液。

作为本发明进一步的改进，所述浓缩的方法包括：冷冻干燥、喷雾干燥和减压水分蒸发，得到的高浓度胶原蛋白水解产物密度为2-3.5g/cm³。