[发明专利]用于鉴别检验非洲猪瘟病毒的PCR扩增引物对、及其制备的试剂盒

权利要求书

1.一种用于鉴别检验非洲猪瘟病毒的PCR扩增引物对，其中，所述PCR扩增引物对的上游引物如SEQ.ID.NO.1所示，其下游引物如SEQ.ID.NO.2所示。

2.一种用于鉴别检验非洲猪瘟病毒的试剂盒，其中，所述试剂盒包括权利要求1所述的PCR扩增引物对。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括Taq DNA聚合酶、5×反应缓冲液、dNTPs、ddH₂O；优选地，所述Taq DNA聚合酶浓度为5U/μl，5×反应缓冲液为5×Tris-HCl(pH8.3)，浓度为50mM，dNTPs浓度为2.5mM，所述上游引物浓度为10μΜ，所述下游引物浓度为10μΜ。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括酶混合液和PCR反应液；其中，所述酶混合液由Taq DNA聚合酶、Tris-HCl、EDTA、DTT、甘油和Tween-20组成，所述PCR反应液由所述扩增引物对(其中上游引物、下游引物体积比为1:1)、5×反应缓冲液(5×Tris-HCl50mM)、dNTPs和ddH₂O组成；

优选地，所述Taq DNA聚合酶、Tris-HCl、EDTA、DTT、甘油和Tween-20含量分别为0.5U/μl、25mM、0.05mM、0.05mM、40％V/V、0.2％V/V，所述扩增引物对(其中上游引物、下游引物体积比为1:1)、5×反应缓冲液(5×Tris-HCl)、dNTPs和ddH₂O按4:10:5:21的体积比混合，所述上游引物、下游引物浓度分别为5μM，所述5×Tris-HCl(pH8.3)浓度为50mM，dNTPs浓度为1.5mM。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括非洲猪瘟病毒DNA提取试剂。

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包括阳性对照1、阳性对照2、阴性对照，所述阳性对照1为含有能为所述PCR扩增引物对扩增出的如SEQ.ID.No.3所示非洲猪瘟病毒基因片段的重组质粒，所述阳性对照2为含有能为所述PCR扩增引物对扩增的如SEQ.ID.No.4所示非洲猪瘟病毒基因片段的重组质粒，所述阴性对照为蒸馏水。