[发明专利]一种(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸乙酯的分析方法

说明书

本发明提供了一种液相色谱分析(E)‑4‑苯基‑4‑氧代‑3‑丁烯酸乙酯中(E)‑4‑苯基‑4‑氧代‑3‑丁烯酸甲酯及富马酸二乙酯杂质含量的方法，本发明所提供的方法专属性强、分离度好，并且方法耐用性好、灵敏度高。

技术领域

本发明涉及化学分析领域，特别涉及液相色谱检测(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸乙酯中(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸甲酯及富马酸二乙酯含量的分析方法。

背景技术

普利类抗高血压药是临床上运用非常广泛的抗高血压药，代表性的药物主要有赖诺普利、依那普利、雷米普利及苯那普利等。(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸乙酯(TAE)是普利类药物的一种重要中间体，结构式如下所示：

我们对TAE的合成工艺进行优化及杂质研究时发现，在工艺中会产生3个主要杂质，即(Z)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸乙酯(Z-TAE)、(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸甲酯(MBA)及富马酸二乙酯，其中MBA及富马酸二乙酯两个杂质在已有的HPLC方法中使用的C18、C8等液相色谱柱分离效果特别差，且此两个杂质会对后续普利类药物合成过程中收率及质量造成重大影响，因此我们需要开发一个合适的方法分离此两个杂质，然后在生产工艺中对其实行分开控制的策略，以便降低TAE杂质含量并确保最终能得到高质量的普利类药物成品。

发明内容

通过一系列的方法摸索，我们发现因TAE、MBA及富马酸二乙酯中均含有明显共轭基团，结构差异较小，C18、C8等常规液相色谱柱对以上各个组分特别是MBA及富马酸二乙酯二者分离效果很差，后续我们考察后发现，当色谱柱采用氰基类填料的色谱柱，会对此类结构差异小的化合物有很好的分离效果。

据此，本发明的提供一种专属性高，耐用性好、干扰杂质少的液相色谱检测(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸乙酯(TAE)中杂质的分析方法，所述杂质包括(E)-4-苯基-4-氧代-2-丁烯酸甲酯(MBA)及富马酸二乙酯含量，所述方法包括以下步骤：

(1)将含有TAE样品溶解于稀释液中以制备样品溶液；

(2)对样品溶液进行高效液相色谱分析；

其中色谱条件如下：

分析柱：氰基色谱柱；

柱温：10～60℃；

流动相：由流动相A和流动相B组成；其中流动相A选自：水、有机酸水溶液或无机盐水溶液；流动相B选自：甲醇或乙腈；

稀释液选自：有机溶剂，或水与有机溶剂混合物；

检测波长：200～300nm；

流速：0.1～5.0mL/min；

检测器选自紫外检测器(UV detector)。

检测波长：200～300nm；

流速：0.1～5.0mL/min；

检测器选自紫外检测器。

其中所述的氰基色谱柱的固定相组成成份选自二异丙基氰丙基键合硅胶、氰丙基苯基二甲基键合硅胶或氰丙基二甲基键合硅胶。

其中所述无机盐水溶液选自磷酸盐水溶液或全氟磷酸盐水溶液。

其中所述有机酸水溶液选自甲酸水溶液、乙酸水溶液或三氟乙酸水溶液。

其中作为稀释液的有机溶剂进一步选自二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲醇、乙醇、乙腈。