[发明专利]一种具有红色荧光活性的检测蛋白及其应用有效
| 申请号: | 201910766160.X | 申请日: | 2019-08-19 |
| 公开(公告)号: | CN110437341B | 公开(公告)日: | 2022-05-17 |
| 发明(设计)人: | 朱传刚;沈元曦;纪荣毅;柴瑞;林矫矫;洪炀;马以桐 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;G01N33/68 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 具有 红色 荧光 活性 检测 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种具有红色荧光活性的检测蛋白C3-RFP,其特征在于所述检测蛋白C3-RFP包括链球菌蛋白G片段和荧光蛋白,所述链球菌蛋白G片段为链球菌蛋白G的C3区段,所述荧光蛋白为优化后的红色荧光蛋白,所述检测蛋白C3-RFP具有荧光活性和与不同物种抗体结合的双重活性,其中链球菌蛋白G的C3区段的核苷酸序列为SEQ ID NO.6所示,氨基酸序列如SEQID NO.7所示;其中优化后的红色荧光蛋白的核苷酸序列为如SEQ ID NO.8所示;氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示,所述检测蛋白C3-RFP的核苷酸序列为如SEQ ID NO.10所示;氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。
2.一种制备如权利要求1所述的具有红色荧光活性的检测蛋白C3-RFP的方法,所述方法为:
根据C3片段的基因序列,从含有C3片段的菌液中PCR扩增出C3序列,使用的引物对如SEQ ID NO.1、2所示;
通过PCR从含有RFP序列的菌液中扩增出RFP序列,使用的引物对如SEQ ID NO.3、4所示;
先将扩增出的RFP序列双酶切后,连接到表达载体上,经鉴定后再将C3片段双酶切后连接上去,构建重组蛋白的原核表达质粒;
将共表达载体转入表达宿主中培养,活化至对数生长期后加入诱导表白蛋白;
经破碎、纯化后制得融合蛋白C3-RFP。
3.如权利要求1所述的具有红色荧光活性的检测蛋白C3-RFP在纯化抗体中的应用。
4.如权利要求1所述的具有红色荧光活性的检测蛋白C3-RFP制备免疫分析产品的应用,所述免疫分析产品选自探针、试纸条、芯片、试剂盒。
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